一种简易的利用Pfu_DNA聚合酶进行反向长距离PCR获得定点突变的方法.pdfVIP

一种简易的利用Pfu_DNA聚合酶进行反向长距离PCR获得定点突变的方法.pdf

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植 物 学 报 , (): 7 DE 4 48.W43! !#$%#$’($)(’($ %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% ·快讯 · !#$%#’’()*+,%*#) 一种简易的利用 -.(/012聚合酶进行反向长距离 -3 获得定点突变的方法 董宇清 于 昕 赵进东! (北京大学生命科学学院,北京 ) !#$! 摘要: 定点突变是一种常用的分子生物学方法。利用 %’()*+聚合酶进行反向长距离 %,-可以有效地获得定点 突变。方法操作简易,突变效率高于 ./。整个操作过程可在一个试管中完成,不需亚克隆。对克隆在大质粒(如转 化植物的 类型质粒)尤为实用。 01( 关键词: 反向长距离 ;质粒;定点突变 %,- 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) 2.34 + 4$$5$3.674548.58 2!*’ 56,)78,9 ;6%#7.#$!*%6/96+*.*+;(%,6)69*9=9*) #)/7*9%,)+6 4 : 4 ?)@6$96-3*)%6-$696)+6#.-.(/012-#5’6$,96 : ! , , )9*:;’(21 ; ?1 @A+9B1()C = = ( , , , ) !##$$ ’($)*($+*$, -$.(+ /+(0$1,(2 DE11 !#$! ,G1H % % 3 F= : 2A9%$,+% I1JE(KEM11MN’JHEEK1KGHKOEEP1QER’KEQ1NCREM’RHTO1CRC HQO1CMGEN1KJTU0GEH’JGCTK L = S =S S GHVEQEVERCEQHK1N REHQEHK NEJGCQCTK1JE(KEM11MN’JHEEK1KCH EEKC RHKN1QK’K1 RC Q1K5 L L S L = S= L = = JHME1VETKE%,-1JGE TEKEMEC%’()*+ CRNETHKEU0GEE1M1EM CJG1KNEJGCQ1KG1GETJGH./ L L S S = HQJGEEJ1TE TCMEQ’TEMHOE ETCTNEQ’KJ1CEJ’OEU*CK’OMRC1 1KEEQEQU0G1KNEJGCQ1KEKEM

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