桑黄菌液体发酵培养基的研究.pdfVIP

国际食(芮)用菌生物科学高峰论坛蔓第二届中国(古田)食用笛节——纪念中国食用菌协会成立二十周年论文I(2007年) 桑黄菌液体发酵培养基研究 傅海庆1,2陈绍军n骆文灿1陈汉清1林河通1 1福建农林大学食品科学学院，福州，350002；2福建农林大学科技开发总公司，福州，350002 摘要：目的探讨桑黄液体发酵的适宜培养基，可供进一步研究其液体发酵工艺及提取有效成分参考。 方法首先用单因素单指标法筛选，再用正交试验双指标法筛选。结果桑黄菌生长所需最适C／N比为24； 最适的碳源为黄豆粉和玉米粉，适宜的浓度分别为4％和3％；最适的氮源为小麦麸粉，适宜的浓度为O．5％； 酵适宜的培养基配方是(g／L)：黄豆粉40，玉米粉30，小麦麸粉5，酵母浸出汁4，CaS0410，K2S041， Na2HP04 1．5，ZnS04·7H200．1，FeS04·7H200．5，VBIO．1。 关键词：桑黄液体发酵培养基药用真菌深层培养 文献标识码：A 中图分类号：Q93．9 前言 桑黄(Phellinus 下，疵瘕积聚，癖软，脾虚泄泻等【l,61，在日本则作为利尿剂使用同。现代研究发现，桑黄有抗肿瘤的功效，是目 前国际公认的生物治癌领域中有效率排在第一位的真菌，从而使其身价百倍。桑黄菌的抗癌功能最早被日 本学者Tetsuro 研究还表明具有抗癌作用的物质是桑黄菌子实体中的多糟蝴。目前，桑黄在国际医药市场上价格昂贵、供不 应求[10,ll】o 由于天然的桑黄数量非常稀少，加上国内各产地进行掠夺性开采，已难以成为稳定的工业产品来源。因 此，寻求人工培育的方法，研究以大量易得的菌丝体形式代替子实体人药已成当务之急，这对于保护天然资 源、解决资源缺乏、满足市场需要、提高经济效益，均具有十分重要的意义。本文探讨了桑黄菌液体发酵的最 适培养基，可供进一步研究液体发酵工艺及其提取桑黄有效成分参考。 1实验材料与方法 1．1实验材料 1．1．I菌种：桑黄菌种由福建农林大学生命科学学院微生物保藏室提供，编号为Ph．10001。 1．1．2原料：黄豆、土豆为市售蔬菜，玉米粉、麸皮粉、花生饼粉、黄豆饼粉为市售饲料。 1．1．3主要试剂：酵母膏、蛋白胨为生化试剂，维生素B。、维生素B：为医药品，其它试剂均为分析纯。 1．2主要实验设备和仪器 离心机、AB204一N电子天平、隔水式电热恒温培养箱、101—1型干燥箱等。 1．3原料的处理 1．3．1土豆：去皮切成小块状或刨成丝状，称量后加入适量水煮沸O．5h，以两层纱布过滤取汁使用。 1．3．2其它原料：经进一步烘干后磨成细粉，通过150目金属网弃渣后使用。 1．4菌种培养 一102— 国际食(蔼)用菌生物科学高峰论坛暨第二届中国(古田)食用菌节——纪念中国食用菌协会成立二十周年论文集(21307年) 1．4．1母种的斜面培养：用马铃薯培养基(PDA)；28。C恒温培养至菌丝长满斜面为止，冷藏备用。 1．4．2摇瓶液体种子培养： 1．5、VBl 培养基配方(s／L)：玉米粉50、麸皮30、KH2S043、MgS04 0．1、pH自然。 入一级种子，旋转式摇床培养10d，转速150rpm，温度28℃。 1．5试验方法 1．5．1桑黄菌液体发酵营养因子的研究： 1．5、VB。0．1。 1．5．1．1基础培养基(g／L)：葡萄糖30、酒石酸铵4、KH2PO。3、MgS047H：O 28℃培养lO天，测定其菌丝干重或菌丝多糖含量。 1．5．1．3液体发酵营养因子C／N比试验： 在基础培养基中以309／L葡萄糖为碳源，不同含量的酒石酸铵作为氮源，构成C／N比值分别为10、15、 20、25、30、35、40、45的培养基进行试验。 1．5．1．4液体发酵碳源试验： 本试验选择了9种常见的原料作为碳源，其中，单糖选葡萄糖、甘露醇，二糖选蔗糖、果糖、乳糖，多聚碳 水化合物选可溶性淀粉、黄豆、玉米粉和土豆。按309／L分别加入各种碳源替换基础培养基中的葡萄糖组成 配方进行试验。 1．