鸡传染性法氏囊病灭活疫苗免疫鸡中与抗体滴度与攻毒保护力相关关系的研究.pdfVIP

第十三次学术研讨会会议论文集 3讨论 目前国内外已经研究出多种鸡毒支原体感染的诊断方法14J，尤其是以抗原抗体反应为基础的多 种血清学诊断方法，操作简便、易于判定、经济实用，现已广泛应用于兽医临床诊断及科学研究多 个领域。但是由于鸡毒支原体抗血清常常容易与鸡滑液囊支原体等出现交叉反应等原因，检测特异 性和检测灵敏度仍是鸡毒支原体血清学检测方法无法完全解决的问题。此外，研究表明鸡毒支原体 多个蛋白具有变异性，包括可被鸡免疫系统识别的粘附素蛋白(P、rpA)，更使得血清学检测方法的 使用具有一定局限性p¨Ⅲ。 PcR检测方法的灵敏度与特异性在很大程度上取决于所选择的引物序列。目前国内外常用的 MG检测目的基因有16S 等口l文献根据mgc2部分基冈片段设计一对引物，建立的PcR方法可以有效地避免出现假阴性或假 阳性¨j，提高检测灵敏度和特异性。 MG是危害养禽业发展的重要病原，至今仍是现代集约化养禽业的防控重点。在中国控制MG 感染的主要措施是使用抗菌药物和接种疫苗，但长期大量使用抗菌药物易出现耐药菌株使得治疗效 果下降甚至失效，且使用药物并不能彻底根除MG，感染鸡群仍持续带毒，当出现病毒感染或疫苗 接种时可激发再次感染18】。因此，进行及时有效的疫苗接种时控制MG感染的重要措施。 参考文献(‘) 鸡传染性法氏囊病灭活疫苗免疫鸡中和抗体滴度与攻毒保护力相 关关系的研究 李林1景小冬1张建伟章振华郑小兰姜北宇。 (北京市农林科学院畜牧兽医研究所北京100097) 摘要以不同剂量的鸡新城疫，传染性法氏囊病二联灭活疫苗免疫3周龄的sPF鸡，免疫后采血测定mD中和抗 体，并用IBD强毒攻击，攻毒后72小时，剖检所有试验鸡，观察鸡法氏囊等病变，将每只试验鸡mD中和抗体滴 度与攻毒保护情况进行一一对照。结果显示，当mD中和抗体滴度≥l：16384(214)时，可获得loo％的保护，滴度 l：256(28)时，其保护率为33．3％，滴度5l：128(27)时，其保护率为O．试验证明，鸡的mD中和抗体滴度与 攻毒保护力密切相关。 鸡传染性法氏囊病(IBD)是由病毒引起的雏鸡的急性、接触性传染病，不仅能使雏鸡发病死 亡，而更重要的是mD病毒破坏雏鸡的免疫中枢器官．法氏囊，导致严重的免疫抑制，使养鸡业造成 二联灭活疫苗，并获农业部新兽药证书。十几年来，该疫苗在全国各省市鸡场应用，有效地控制了 ND及IBD的发生。 ND—IBD二联灭活疫苗已被正式列入2005年版《中国兽药典》。在该版《中国兽药典》中的ND—mD 二联灭活疫苗效力检验标准规定，IBD部分效力检验必须同时采用血清学及免疫攻毒两种方法【2j， 其检验方法比较烦琐，经第四届中国兽药典委员会讨论，决定进行修改，改成这两种方法中任择其 一进行检验。为了保证修改后的标准的可行性，必须要明确ND—IBD二联灭活疫苗免疫后mD中和 抗体滴度与攻毒保护力的相关关系。受中国兽药典委员会的委托，我们承担了ND．IBD二联灭活疫 苗免疫后IBD中和抗体滴度与攻毒保护力相关关系的研究任务，为制、修订2010年版《中国兽药 典》提供技术依据。 1材料与方法 1．1材料 1．1．1疫苗 3批鸡新城疫、传染性法氏囊病二联灭活疫苗，由本研究室制备，批号为2008．01、2008—02及 1 1 85 禽类传染病一其他 2008一03。 1．1．2鸡胚 由北京实验动物中心购入SPF鸡种蛋，本研究室孵化至10一11日龄。 1．1．3攻毒用强毒 鸡，取发病鸡的法氏囊制备出的囊毒，其毒价为106。oBID5棚．2IIll。 1．2方法． 1．2．1中和抗体测定方法 血清中和抗体测定采用微量滴定法。试验前待检血清要进行灭活处理，在56℃水浴，灭活30 分钟，并待冷却后应用。首先，在细胞培养板(第一块板)上用Hank’s液将待检血清作2倍系列稀 作用1小时；然后，在另外一块细胞培养板(第二块板)上加细胞悬液，每孔0．15ml，每毫升含llO 万细胞，每孔总数16．5万；将第一块板每孔0。05ml液体移入第二块板相应孔内，1个样品1个吸头。 试验时设置正常对照、阴性血清对照、阳性血清对照及病毒对照。将细胞培养板用透明胶带密封， 振荡2分钟，放37℃温箱培养，3．5