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平面二维毛细管电泳初探.pdf
平面二维毛细管电泳初探*
孙玉娥 关亚风**
中(国科学院大连化学物理研究所分析室 大连 116012)
提 要 在石英单晶表面制成矩形截面的毛细管柱上进行了电泳实验。由于矩形柱比圆形柱有更大散热侧面
积且石英单晶的导热性能远远优于熔融石英,所以可施加较高的场强,不仅提高了柱效,而且缩短了分离时间。
两个相交的通道之间形成自然连接,可实现二维分离,并消除了死体积。
关键词 毛细管电泳,矩形截面毛细管柱,二维分离
分类号 O658
1 前言 减小通道尺寸提供了实验基础和理论指导。
自1937年瑞典科学家Tiselius1()首次利用电泳 2 实验部分
技术从人的血清中提取4种蛋白质以来,电泳技术
2.1仪器与装置图
得到了广泛的应用。因为电泳的柱效跟所施加的电
高压电源 0(~?10kV),自动平衡记录仪,自己组
场强度成正比,所以为提高分离效能,需增加电泳两
装的UV可调单波长检测器,电泳通道为250mm×
端的电压。但是,电压的增加又受到其内部介质焦耳
0.6mm×0.1mm为(了增加电泳通道长度,采用折线
热的限制。解决散热问题是提高电泳柱效的关键。很
型通道)。电泳装置示意图见图1。
多人 2(~4)在这方面做了努力,他们通过不断减小电
泳柱内径的方法来解决散热问题,取得了较好的结
果。但由于柱子的样品负荷与柱内径的3次方成正
比,柱内径的减小使样品负荷迅速下降,因此产生了
进样与检测等诸多问题,限制其更广泛的应用。
提高电泳分离能力的另一有效的方法是采用矩
形截面的毛细管柱。因为相同截面和相同长度的矩
形柱比圆形柱有较大的比表面积,因而矩形柱的散 图1 电泳装置示意图
热性能必然优于圆形柱。1989年瑞典的Roeraade等
人5()对此做了详细的理论推导,充分证实了矩形柱
的这一优势。后来,Manz等人6(~7)又从实验上对矩
形截面柱的分离情况做了较深入的考察。他们利用
光刻技术在玻璃片上制成10μm×30μm的微通道做
电泳实验,仅用1分多钟就将3种氨基酸完全分开,
2.2 试剂
柱效达10万以上。但是,由于电泳通道尺寸太小,影
10mmol/L磷酸盐缓冲溶液,其pH值为4.0,
响因素太多,他们未能对谱带展宽等因素给予圆满
10mmol/L硼酸盐缓冲溶液,pH9.18,二甲基亚砜、
的解释,并且基质材料为散热性能不太好的玻璃,必
氯化三甲基苄按、Bromphenamin和Reproterol均
然影响散热效果。
为分析纯。
我们在实验中采用散热性能很好的石英单晶作
2.3 实验步骤
基质材料,先从较大的电泳通道 2(60mm×0.7mm×
将分析物质用去离子水配成1×10-3mol/L的
0.1mm)入手来考察电泳进行情况以及导致谱带展
溶液,用1μL微注射器经图1中贮液槽向通道口内
宽的因素,并初步探讨二维分离的可能,从而为继续
*本项目获国家自然科学基金资助,项目
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