鸡大肠杆菌分离鉴定及药敏试验.pdfVIP

78 广东农业科学 2008年第 11期 鸡大肠杆菌分离鉴定及药敏试验 杨明凡 ，李晓峰，陈红英，唐湛伟 ，高文明 (河南农业大学牧医工程学院，河南 郑州 450002) 摘 要 ：采集河南某地养鸡场临床疑似患大肠杆菌病 的死鸡的肝脏 、脾脏和淋 巴结，对分离的细菌进行显微镜检查、细 菌生化试验 、大肠杆菌0抗原血清型鉴定和 PCR检测 ，分离鉴定结果为大肠杆菌感染 。药敏试验结果表明，分离菌株对氟 苯尼考、头孢拉定和环丙沙星高度敏感 ；对头孢唑啉、恩诺沙星、呋喃妥因、阿米卡星、磺胺嘧啶、和林可霉素 中度敏感 ；对 氨苄青霉素、庆大霉素 、红霉素、氟哌酸、氯霉素、四环素、链霉素、痢特灵、卡那霉素、麦迪霉素等均有耐药性，说 明大肠杆 菌耐药性普遍存在 ，建议临床上治疗鸡大肠杆菌病时应先做药敏试验 ，以筛选 出对相应大肠杆菌菌株敏感 的药物 。 关键词 ：鸡 ；大肠杆菌；分离；鉴定；药敏试验 中图分类号 ：$858-3l2．61+2 文献标识码：B 文章编号 ：t004—874X(2008)l1-0078—02 禽大肠杆菌病是 由大肠埃希氏菌某些血清型引起 物为5 GATGCCTATGCTCGTCATIAC3。所用引物 由 的禽类传染病 ，该病主要危害幼禽 ，特别是肉鸡 。该病 上海生工生物工程技术服务有限公司合成。 表现不同的病型，常见 的病型有急性败血症 、气囊炎 、 1。1．4 药敏试纸 氨苄青霉素(AMP)、阿米卡星(AMK)、 腹膜炎、卵巢炎、输卵管炎、脐炎、肉芽肿等。 目前该病 林可霉素(IM)、氟苯尼考(GEN)、磺胺嘧啶(TET)、庆大霉 仍然是影响我国养禽业发展的主要疾病之一 ，造成 了 素(GM)、红霉素(ETM)、氟哌酸(FOX)、氯霉素(CMP)、头 相当大的经济损失Ⅲ。对该病的预防和治疗主要是依靠 孢 唑啉 (CFZ)、四环素 (TC)、链 霉 素 (SM)、恩诺沙 星 一 些抗菌药物，尤其是抗生素 ，导致耐药菌株越来越 fERFX)、呋喃妥 因fNrT)、头孢拉定fCED)、环丙沙星 多，并且不断产生一些新的耐药菌株 ，从而使这些抗生 (CIP)、痢特灵(FZ)、卡那霉素(KM)、麦迪霉素(MD)等抗 素在临床上的应用效果很差闭。因此 ，临床治疗大肠杆 菌素药敏试纸片均购 自杭州天和微生物试剂有 限公 菌病最好先进行药敏试验 ，选择敏感药物治疗该病才 司。 有较好 的疗效 。2007年 10月河南某地养鸡场的鸡群 1．2 试验方法 严重腹泻且有呼吸道罗音等症状 。根据临床症状和剖 1．2_1 细菌的显微镜检查 将病料直接涂片 ．革兰氏 检病变 ，病死鸡疑似感染大肠杆菌。我们采集相应病料 染色后在显微镜下观察细菌的形状及染色特性。 进行了细菌 的分离培养 、生化试验 、O抗原血清型鉴 1．2．2 细菌的分离培养及纯化 无菌操作下取肝脏 、 定 、PCR鉴定 以及药物敏感试验 ，现将分离鉴定及试 脾脏、淋 巴结等组织，划线接种于普通营养琼脂、麦康 验结果报道如下。 凯琼脂上 ，37qC下恒温培养 24h后观察细菌生长及菌 落特征。取初步分离的细菌 ，划线接种于麦康凯培养基 1 材料与方法 上 ，37℃下恒温培养 24h，挑选典型菌落进一步培养。 1．1 试验材料 1，2。3 细菌生化试验 按照参考文献f31的方法进行 1．1．1 病料 供试病料为发病鸡的肝脏、脾脏 、淋 巴结 细菌的糖类发酵试验 、吲哚试验 、M。R试验 、V—P试验 、 以及十二指肠 ，采