精液DNA倍体分析与细胞学检查对非梗阻性无精子症生精功能的预测价值.pdfVIP

汇报时间：2011．12．1013：30～13：45 精液DNA倍体分析与细胞学检查 对非梗阻性无精子症生精功能的预测价值 杨施，卢慧，施文博，冯锡武，王柱清，胡洪亮，李铮“通信储¨ (上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科，上海男科学研究所精子发育与遗 传学实验室，上海市人类精子库，上海200001) 【摘要】 目的：目前临床上尚无确切的方法判断非梗阻性无精子症患 者睾丸生精小管是否有精子发生以及通过睾丸取精术获取精子的几率。流式细胞 技术，作为对细胞DNA倍体分析的一种快速敏感、精确、客观检测方法，可结 合精液细胞学检查对睾丸生精障碍进行诊断，以探索判断睾丸生精功能的预测方 法。本研究通过对非梗阻无精子症患者精液细胞进行DNA倍体分析和细胞学检 查，探讨精液细胞DNA倍体与细胞学检查结果之间的关系，以期建立一种非侵 入性的诊疗方案，应用于预测非梗阻无精子症患者获取精子的结局。 材料与方法：12例患者均已临床确诊为非梗阻无精子症，年龄为24--48岁， 经B超睾丸体积检测，性激素测定，染色体核型分析与Y染色体微缺失筛查。 手淫法留取精液。待精液液化后离心取沉淀物，用磷酸缓冲液(PBS)洗涤后分为 2份。l份采用70％冰乙醇重悬精液沉淀，4℃固定后用PI染色，采用流式细胞 待自然干燥后，进行 仪进行DNA倍体分析。同时，取l份精液沉淀涂片， Diff-Quick染色，油镜镜检。 结果：DNA倍体分析结果表明，12例非梗阻无精子症患者精液中均存在单倍 体(1N)、二倍体(2N)和四倍体(4N)细胞，其中二倍体细胞含量最高，介 胞含量介于O．82～12．4％。精液细胞学检查结果表明，12例非梗阻无精子症患者 精液中均存在精原细胞、精母细胞和精子细胞，4例患者精液中存在自细胞。比 较两种方法发现，DNA倍体分析结果与精液生精细胞检查存在良好的对应关系． 单倍体细胞含量较高的精液标本同时具有大量的精子细胞，而四倍体含量较高的 精液中能够检查到初级精母细胞。DNA倍体分析较精液细胞学检查更灵敏，而 精液细胞学检查更加特异、直观。 ．92- 结论：精液细胞DNA倍体分析与细胞学检查作为两种非侵入性的检查方法， 均可以作为判断患者生精功能的辅助诊疗手段，两种方法的检查结果可作为预测 非梗阻无精子症获取精子结局的参考指标。 【关键词】 非梗阻无精子症；DNA倍体分析：精液细胞学检查 -93-