CPT1基因对猪脂肪沉积与影响及调控机制与研究.pdf

摘要 摘要 本研究以肉脂型的金华猪和瘦肉型的长白猪为试验对象，在比较研究两猪 种胴体品质和肉质的基础上，探讨脂肪酸p．氧化关键酶肉碱棕榈酰转移酶l (CPTl)在金华猪和长白猪不同组织中的表达特异性、不同生长阶段的表达规 律及品种间的差异，研究CPTI基因表达在脂肪沉积中的作用，及其与体脂和 肌内脂肪沉积的关系。通过猪肌内前体脂肪细胞体外培养模型的建立，利用CBl 素l型受体(CBl)基因对CPTI调控的分子机制。主要研究结果如下： 1．金华猪、长白猪胴体性状及肉质性状的比较研究 结果表明，180日龄金华猪瘦肉率和眼肌面积均显著小于同日龄的长白猪 (p0．01)：金华猪肌内脂肪含量显著高于长白猪(p0．01)，金华猪背膘厚、 脂肪率和皮脂率均显著高于长白猪(p0．01)：金华猪压出水比显著低于长白猪 (p0．01)；金华猪滴水损失低于长白猪，但差异不显著(p0．05)；金华猪和 长白猪宰后45min肌肉pH值差异不显著(p0．05)，且均在正常范围内；肉色 中金华猪L值显著高于长白猪(p0．01)，两猪种a值和b值差异不显著(p0．05)。 试验表明，金华猪和长白猪在胴体品质和肉质上存在显著差异，在肉质上，金 华猪肉质优于长白猪。 2． 金华猪、长白猪血液生化指标及脂肪代谢相关酶活的比较研究 与长白猪相比，金华猪具有较高的血清总胆固醇(TC)含量、低密度脂蛋 B)含量；具有较低的血清甘油三酯(TG)含量和脂 白(LDL)和载脂蛋白B(Apo a)含量。在皮脂中，金华猪激素敏感脂肪酶(HSL)的活性显著低于 蛋白a(Lp 种上，HSL、脂蛋白酯酶(LPL)和HL的活性在脂肪组织中最高，肝脏组织中 其次，肌肉组织中最低。 3．猪CPTI基因表达的组织特异性、表达规律及品种差异研究 CPTI基因的两种亚型L．CPTl和M．CPTl在猪的不同组织均有广泛的表 达。L—CPTImRNA在肝脏、胰脏和十二指肠中表达量较高，在背最长肌、皮 II 摘要 脂、脾和脑中表达量较低。M．CPTImRNA在背最长肌和皮脂中表达量较高， 在肾脏、脾脏、脑、肺和十二指肠中表达量较低。在不同生长阶段的金华猪和 长白猪上，L．CPTl和M．CPTl具有相似的表达规律，两基因的mRNA表达量 都呈现先上升后下降的趋势，在30日龄时表达量达到最高。品种差异性比较研 究的结果表明，在背最长肌中，金华猪的CPTlmRNA表达量和蛋白表达量均 显著高于长白猪(p0．01)，且与肌内脂肪含量呈正相关：在皮下脂肪和腹脂中， 金华猪的CPTl mRNA表达量和蛋白表达量均显著低于长白猪(p0．01)，且与 体脂肪率呈负相关。提示CPTI基因与体脂和肌内脂肪沉积有密切的关系。 4．CBl对CPTl基因表达和脂肪沉积的影响 通过猪肌内前体脂肪细胞体外培养模型的建立，利用CBl激动剂A9．THC 肪沉积的影响。研究结果表明，CBl激动剂激活CBl基因表达后，显著降低了 CPTI基因的表达，同时增加了细胞内脂滴的沉积，减少了培养基中甘油的含 表达，同时减少了细胞内脂滴的沉积，增加了培养基中甘油的含量。在培养基 中添加CPTI的抑制剂乙莫克舍(ETM)后，未对CBl基因的表达产生影响， 推测CBl可能是CPTI的上游基因。A9．THC和ETM共同处理猪肌内脂肪细胞 后，二者产生正协同作用，显著降低了CPTI基因的表达，增加了细胞内脂滴 的沉积，减少了培养基中甘油的含量。同时研究还发现，A9．THC下调CPTI 表达时，也伴随着PPARt]L基因的表达升高。上述结果提示，CBl可通过调控 CPTI基因的表达进而影响脂肪沉积。在此过程中，PPARa信号通路可能发挥 着重要的作用。 关键词：CPTl；CBl；脂肪沉积；分子机制：猪 III Abstract Abstract the