热应激对雏鸡肠黏膜消化酶发育的影响及GABA调控.pdfVIP

热应激对雏鸡肠黏膜消化酶发育的影响及GABA调控 王博(08级本科生)指导教师：陈忠 (海南师范大学生命科学学院，海口。571158) 【摘要l为了探讨热应激对文昌鸡雏鸡肠黏膜标志酶(主要是肠二糖酶、碱性磷酸酶和ATP 酶)活性和其上皮细胞吸收功能发育过程的影响，以及GABA对热应激雏鸡小肠粘膜发育的保护作 用。本试验选取l13龄的文昌鸡随机分为3组：对照组雏鸡饮用蒸馏水；热应激组(I-IS)雏鸡饮用 肠和回肠黏膜用于测定肠黏膜标志酶活性。结果表明：热应激可以导致雏鸡十二指肠、空肠和回肠 D一木糖吸收率为代表的小肠主动吸收功能试验表明，对照组雏鸡血清木糖水平显著均高于同期热 结果显示，热应激降低了雏鸡小肠黏膜标志酶活性，以致小肠的消化吸收功能严重受阻，而GABA 对热应激引起文昌鸡雏鸡小肠粘膜标志酶活性发育损伤具有保护作用，对提高小肠的主动吸收功能 有一定作用。 【关键词l热应激；肠黏膜标志酶；D一木糖；GABA 随着现代化畜禽集约式生产方式的发展，养殖环境已逐渐成为影响和制约畜禽养殖业发展的一 个关键问题，而全球性气温的普遍升高使得畜牧业的生产与经济收人大为减少…。在畜禽生产实践 中，高温热应激是最常见的应激原，是影响畜禽夏季生长性能的主要因素，同时也是爆发畜禽各种 传染病的诱因热应激是指动物机体对热应激原的非特异性防御应答的生理反应，在动物生产、繁殖 过程中是十分关注的重要问题，多年来国内外学者进行了许多研究‘M1。有文献研究表明，热应激 损伤了猪小肠黏膜上皮组织，特别是十二指肠和空肠，而这种损伤是与EGF信号下调相关№1。国内 外在缓解鸡热应激方面采取多方面的措施，主要通过添加谷氨酰胺1、无机盐‘¨1、维生素¨州和 1一氨基丁酸n1。此1等达到减轻鸡的热应激。最近研究表明。热应激可以严重影响肉仔鸡的生产性能， 使肉仔鸡免疫力下降、发病率和死亡率显著升高¨¨引，同时，可导致肠通透性增加和上皮的明显损 害，引起肠屏障功能产生热应激相关的明显障碍¨引。本试验探讨热应激对文昌鸡小肠粘膜吸收功能 发育影响，获得热应激影响文昌鸡肠道黏膜消化吸收功能发育的实验证据，为研究药物治疗、修复 热应激损伤提供科学依据。 1材料和方法 1．1试验动物与饲养管理 选用雄性1日龄的文昌鸡24只(由海南省永基文昌鸡养殖场提供)，随机分3组，重复3组， 每组8只。称重和编号，组间体重、采食量等无显著差异。第一组为对照组；第二组为热应激(HS) 鸡自由饮蒸馏水和采食，各组雏鸡常规饲养，饲料、水供应充足，室内自然通风与光照，鸡舍定期 清扫消毒。 1．2热应激处理 行热处理2h。再将其放回鸡笼中饲养，对照组常规饲养。 1．3样品采集 分别在3、5、7、9日龄，雏鸡热应激处理2h(16：30)后，颈部放血处死，剖开腹腔，取出 mL离心管中， 各组鸡的十二指肠、空肠和回肠，用冰冷的生理盐水轻轻冲洗后，分别刮取黏膜于1．5 一20℃保存备用。 1．4雏鸡黏膜标志酶活性测定 1．4．1肠粘膜液制备取约0．3 mL生理盐水，冰浴匀浆。二糖 g肠黏膜于玻璃匀浆器中，加入2．7 000 000 r／min、3 酶(蔗糖酶和麦芽糖酶)、碱性磷酸酶(AKP)和ATP酶分别在4。C低温离心机中4 000 min、10 r／min和1r／min分别离心10 min和5rain，取上清测定酶活性。 1．4．2蔗糖酶和麦芽糖酶活性测定底物溶液、葡萄糖氧化酶溶液及葡萄糖标准溶液的配置参考 孙哲n7’方法。测定过程：分别取2支试管各加100¨l待测样品溶液(小肠黏膜匀浆离心上清液)， 其中一支为待测管，另一支为空白管。在空白管中加入100pl底物缓冲液；在待测管中加入100pl 分钟，使其充分显色。用冷水冲试管外壁，室温放置15分钟，420nm下用试剂空白调零，lcm比色 杯比色，计算待测样品酶活。 绘制标准曲线，并确定