四个脂肪酸合成酶基因在哺乳动物细胞中的超表达提高长链多不饱和脂肪酸生物合成效率.pdfVIP

生 物 工 程 学 报 朱责明 等 ／四个脂肪酸合成酶基因在哺乳动物细胞中的超表达提高长链多不饱和脂肪酸生物合成效率 ChineseJournalofBiOtechnOIOgy http：／／journals．im．ac．cn／cjbcn September25，2014，30(9)：1464—1472 DOh10．13345／j．cjb．130592 ~2014ChinJBiotech，Allrightsrese~ed 四个脂肪酸合成酶基因在哺乳动物细胞中的超表达提 高长链多不饱和脂肪酸生物合成效率 朱贵明，AbdulmomenAliMohammedSaleh，SaidAhmedBahwal，汪坤福，王明富， 王迪迪，葛堂栋，孙洁 佳木斯大学基础医学院，黑龙汀 佳木斯 154007 朱贵明，AbdulmomenAliMohammedSaleh，SaidAhmedBahwal，等．四个脂肪酸合成酶基因在哺乳动物细胞中的超表 达提高长链多不饱和脂肪酸生物合成效率．生物工程学报，2014，3O(9)：1464—1472． ZhuGM，SalehAA，BahwalSA，eta1．Overexpressionoffourfatt)racidsynthasegeneselevatedtheefficiencyoflong—chain polyunsaturatedfattyacidsbiosynthesisinmammaliancells．ChinJBiotech，2014，3O(9)：1464—1472． 摘 要：DHA(22：6n．3)、EPA(20：5n．3)和ARA(20：4n．6)三种长链多不饱和脂肪酸在生物体 内活性最强，它们 在促进大脑发育和功能维持以及在预防和治疗心血管疾病、炎症、癌症等多种疾病方面有着重要作用。然而， 尽管哺乳动物体 内有完整的长链多不饱和脂肪酸合成酶系，但哺乳动物合成这些长链多不饱和脂肪酸的效率很 低而主要依赖于食物获取。本研究应用转基因方法，将哺乳动物来源的△6和 △5脂肪酸去饱和酶 以及 △6和 △5 脂肪酸延长酶这4种酶的编码基因构建成为一个多基因表达载体，然后转染哺乳动物细胞 HEK293T，实现了 4个 目的基因的超表达，再通过气质联用 (GC．MS)分析证实了DHA、EPA和 ARA等长链多不饱和脂肪酸的 合成效率及水平显著增加 ，DHA 的水平更是提高了 2．5倍 。由此可见，哺乳动物具有某种抑制长链多不饱和 脂肪酸高水平合成的机制，但通过 △6和 △5脂肪酸去饱和酶 以及 △6和 △5脂肪酸延长酶的超表达，能够打破 哺乳动物这种抑制机制，从而显著提高DHA、EPA、ARA 等的合成水平。同时，本研究的思路也为在转基因 动物 中生产长链多不饱和脂肪酸提供 了重要 的启示 。 关键词：多不饱和脂肪酸，脂肪酸去饱和酶，脂肪酸延长酶，多基因表达载体 Received：November21．20l3：Accepted：AprilIl，20I4 Suppodedby：NationalNaturalScienceFoundationofChina(No，theScienceandTechnologyResearchProjectof HeilongJiangProvincalEducationDepartment(No． Correspondjngauthor：GuimingZhu．TeI／Fax：+86—454—8618331；E—mail：xi78926@sina．com 国家 自然科学基金 (No．3l000984)，黑龙江省教育厅科学技术研究项 目 (No．125ll563)资助。 网络出版时间：20l4．04．25 网络出版地址：http：ttwww．cnki．netk／cms／doi／10．13345~．cjb．130592．html 朱贵明 等 ／四个脂肪酸合成酶基因在哺乳动物细胞中的超表达提高长链多不饱和脂肪酸生物合成效率 oVerexpreSsi0noffourfattyacidsynthasegeneselevatedthe eefflili~ciencyyoofllong—．chainDp00llVVUunnSsaattUurraatteeddfattyaacciiddSs lDi●osynt·hlesi●si●nm am m a_ll-a