鲢鱼（Hypophthalmichthys molitrix）背肌中组织蛋白酶B2的纯化与酶学性质鉴定.pdfVIP

第26卷 第 3期 四川农业大学学报 V01．26 N0．3 2008年 9月 JournalofSichuanAgriculturalUniversity Sep．2008 PurificationandCharacterizati0nofCathepsinB2from Dorsal MuscleofSilverCarp (Hypophthalmichthysmolitrix) LIShu．hong ·’。，ZHOUXiao．qiu ．MA Chang—wei。 (1．InstituteofAnimalNutrition； 2．CollegeofInformationandEngineeringTechnology。 SiehuanAgriculturalUniversity，Yaan625014，Sichuan，China； 3．CollegeofFoodScienceandNutritionalEngineering，ChinaAgriculturalUniversity．Beijing100083，China) Abstract：SilvercarpcathepsinB2wasextractedfrom thedorsalmuscle．ThenitW8Spurifiedto 396．5folderbyaseriesofproceduresofacidification，ammonium sulfateprecipitation，ultral—fil— tering，DEAE-Sephacel，SephacrylS一100，SP—SepharoseF．F．，Blue—sepharose6F．F．andConA— Sepharose．Thepurifiedenzymeassumedtwobandsofabout25and20KDaonSDS—PAGE．The optimum temperaturewas3O～ 35℃ ，andtheoptimum pH waspH 5．5．CathepsinB2waseffi— cientlyactivatedbyCys，DTTandp—ME，butwascompletelyinhibitedbyE一64of50l／mol／L．C1一 within100~／mol／LactivatedcathepsinB2，butwhenreaching200~／mol／L，itshouedeffectofinhi— bition．P2O7卜of25mmol／LinhibitedthehydrolysingactivityofeathepsinB2significantly．Sub— stratespecificityanalysisindicatedthatitcouldhydrolyzeZ_Phe。-Arg。-MCA andZ——Arg--Arg—-MCA butnotL-Arg-MCA；thatZ—Arg—Arg—MCAwastheoptimum substratejudgingfrom theK val— uesof7．15and226~mol／L． Keywords：cathepsinB2；silvercarp (Hypophthalmichthysmolitrix)；purification；characteriza— tion 鲢鱼 (Hypophthalmichthysmolitrix)背肌中 组织蛋 白酶 B2的纯化与酶学性质鉴定* 李树红 。一，周小秋 ，马长伟。“ (四川农业大学 1．动物营养研究所； 2．信息与工程技术学院，四川 雅安 625014； 3．中国农业大学 食品科学与营养工程学院，北京 100083) 摘要 ：对鲢鱼背部 白肌中的组织蛋 白酶 B2，进行 了分离纯化及酶学性质 的鉴定 。 目的酶经粗提后，再通过酸处理、 硫酸铵