复方血栓通对猴脉络膜-视网膜内皮细胞增生、移行和管腔形成的作用.pdfVIP

·263· ±堡堕塑堂堂皇塑堂壁兰壅查垫!!至!旦笙!!鲞笙!塑垦堕坠』垒堡!坐生丛坐!型!堡墅i：垒坚鲤塾垫!!!!坐：!!：№：兰 ·论著· 复方血栓通对猴脉络膜一视网膜内皮细胞 增生、移行和管腔形成的作用 罗旭异 吴星伟 顾青 张红梅施宇华仇亚婷 【摘要】 目的 探讨复方血栓通干预猴脉络膜一视网膜内皮细胞(RF／6A)参与血管生成的作用及机 理。方法实验研究。本研究分为四部分：①取对数生长期RF／6A细胞进行培养，设立空白对照组、阳性 对照组以及不同浓度的复方血栓通观察组，每组均加入终浓度为10ng／ml的血管内皮生长因子 fvEGF)。阳性对照组加入终浓度O．20ms／m1的硫酸鱼精蛋白。复方血栓通观察组设立O．39～50．00ms／ml 的多个不同浓度组。培养24h后采用酶联免疫检测仪测定各组吸光度A值，观察不同浓度的复方血 栓通对VEGF诱导的RF／6A细胞增殖的影响。②设立空白对照组和终浓度为3．13、6．25、12．50 mg／n柚 的复方血栓通组，培养24h后检测不同浓度复方血栓通对RF／6A细胞移行的影响。③设立空白对照组 和终浓度为O．39、0．78、1．56 h后检测不同浓度的复方血栓通对RF／6A ms／m1的复方血栓通组，培养12 细胞管腔形成的影响；④设立空白对照组、终浓度为O．20 mg／ml的硫酸鱼精蛋白阳性对照组和终浓度 Blot和实时定量逆转录聚合酶 为1．56、3．13、6．25ms／ml的复方血栓通组，培养24h后，运用Western 链反应(RT-PCRl的方法．分别检测不同浓度的复方血栓通对RF／6A细胞表达VEGF、基质金属蛋白酶2 (MMP-2)蛋白和mRNA的影响。对多组计量资料进行单因素方差分析。结果①各组间A值差异有统 计学意义(F=158．669，P0．01)，同空白对照组比较．0．78—25．00 mg／nfll浓度的复方血栓通对VEGF诱导 的RF／6A细胞增殖具有明显抑制作用(P均o．叭)；②复方血栓通浓度为0、3．13、6．25和12．50m咖ll时， RF／6A细胞移行数分别为123-3±13．8、114．3+15．5、54．0±6．1和40．3-*-10．1，组间差异有统计学意义 (F=36．918，P0．01)；与空白对照组比较，6．25和12．50 mg／ml浓度的复方血栓通对RF／6A细胞移行具 有明显的抑制作用(P均0．叭)；③复方血栓通浓度为0、0．39、0．78和1．56 mg／ml时RF／6A细胞内皮管 腔形成数分别为20．3±2．5、12．7+2．1、9．7±1．2和0．7±0．6，组问差异有统计学意义(F=64．324，P 0．01)；与空白对照组比较，O．39、O．78和1．56m咖l浓度的复方血栓通对RF／6A细胞内皮管腔形成均 具有明显的抑制作用(P均o．01)，且抑制作用随浓度增加而增强；④空白对照组、阳性对照组以及 1．56、3．13和6．25 mg／ml浓度的复方血栓通组VEGF和MMP-2蛋白相对含量组间差异均有统计学意 义(F=343．346、1670．505，P均O．01)；与空白对照组比较，其余各组均具有显著抑制RF／6A细胞VEGF 和MMP．2蛋白表达的作用(P均0．01)，复方血栓通的抑制作用随浓度增加而增强；各组VEGF和 MMP-2 mRNA相对含量的差异也有统计学意义(F=228．130，208．579，P均0．01)，与空白对照组比较， 其余各组均具有显著抑制RF／6A细胞VEGFmRNA表达的作用(P均o．01)，复方血栓通的抑制作用 随浓度增加而增强。结论 复方血栓通可能通过抑制RF／6A