强骨颗粒对骨质疏松症大鼠血清中IGF-I、TGF-β1及骨形态计量学的影响.pdfVIP

陕西中医2009年第30卷第12期 1669 昝 强 陈世柱 王勇刚 陕西中医学院附属医院(成阳712000) 摘 要 目的：探讨强骨颗粒治疗骨质疏松症的疗效及其机制。方法：采用去势方法进行造模，8周 制成大鼠OP模型。设假手术组、模型组、强骨颗粒组、雌激素组，观察大鼠血清中IGF“ 骨组织中TGF—p。及骨形态计量学。结果：治疗4w后，强骨颗粒组均能升高血清中IGF“ 骨组织中TGF一融水平(明显高于模型组P0．05)、增强骨量。结论：强骨颗粒对OP的 疗效机理与血清中IGF“骨组织中TGF一岛水平、增强骨量有关。 主题词 骨质疏松症／中医药疗法 强骨颗粒／药效学 大鼠 实验研究 骨质疏松症(osteoporosis，0P)是一种由多种原因引起的状组织，多被其周围脂肪组织所掩盖，提起后用手术线将其周 以全身性骨量减少、骨组织微细结构退化为特征继而导致骨脆 围相连血管及输卵管结扎，然后切除左右卵巢，用3号手术线 性增加和骨折危险性增高的骨骼疾病，以妇女绝经后骨质疏松 缝合切口，75％酒精消毒切口后，再予伤口涂抹红霉素软膏、肌 症(I型)最多见且难治。我们在中药强骨汤治疗肾虚型骨质疏 注青霉素8万u／100mg，预防伤口感染。假手术组做同样切口， 松症…的基础上，总结制成强骨颗粒并进行实验研究。该实验 找到卵巢后并不切除，只取除局部脂肪组织。 运用强骨颗粒中药制剂对去卵巢大鼠复制的绝经后骨质疏松 1．2．3治疗：造模3m后，强骨颗粒组灌胃每日给予药液 症模型进行干预，通过观察骨形态计量学、血清中IGFr、骨组 织中TGF—p，水平。研究强骨颗粒对骨质疏松症的作用机制，揭 示中医药治疗骨质疏松症的微观依据。 灌服生理盐水；假手术组、模型组按每天lmL／1009灌服生理 1 材料与方法 1．1材料 盐水；以上各组均灌胃1次／d，连续6d，休息1d，再连续6d，休 1．1．1实验动物：本实验选用6月龄(SD)雌性大鼠32息1d，如此给药4w。 只，体重(220士20)g，由陕西省中医研究院实验动物中心提 1．3 统计学处理方法 数据以j士5表示，用单因素方差 供。 分析对实验结果进行统计，采用SPSSll．0统计软件进行处理。 1．1．2药品与试剂：苯甲酸雌二醇注射液(上海通用药业 2观察指标及测试方法 2．1 骨组织形态计量学指标 股份有限公司)，强骨颗粒(由淫羊藿、骨碎补、黄芪、鹿角胶、三 的测定 脱钙骨切采用混合酸法。采用JD801形态学图像分 t定量EIA试 析系统，对实验大鼠胫骨近端脱钙骨切片进行形态计量，分别 七组成)常规水煎制成生药量0．89／mL，大鼠IGF 剂盒(上海森雄科技实业有限公司)，正常山羊血清、即用型生 梁数目(Tb．N)、骨小梁分离度(Tb．Sp)。 物素标记的羊抗兔IgG、即用型ABC复合物、DAB显色试剂盒 (武汉博士德公司天津分公司)，兔抗TGF—B(北京中山生物公 2．2血清中IGF—I水平的测定所有大鼠以开胸心尖取 司)，聚赖氨酸玻片(福州迈新生物技术开发公司)。 1．1．3主要仪器：DK一8A型电热恒温水浴箱(上海精宏分离血清。按大鼠IGF一一定量EIA试剂盒标准步骤测定血清 IGF．1水平。 实验设备有限公司)，KDC一40型低速离心机(科大创新股份有 限公司中传分公司)，RJ一2100C型酶标仪(深圳市雷杜电子有2．3 骨组织中TGF一融表达的测定取大鼠左侧胫骨近 限公司)，JD80l形态学图像分析系统处理。 端1／3，去除软组织，用4％多聚甲醛溶液中固定24h之后，进 1．2方法 1．2．1 动物分组：随机抽出8只大鼠为假 行脱钙。脱钙采用混合酸法采用免疫组化法检测骨组织中 手术组，剩余24只在造模成功后随机