缺氧复氧对血管内皮细胞t-PA、PAI-1、NO及NOS表达与影响及辛伐他汀与干预研究.pdfVIP

缺氧复氧对血管内皮细胞tPA、PAl-1．NO及NOS表达的影响及辛伐他汀的干预研究 中文摘要 表达的影响及辛伐他汀的干预研究 中文摘要 他汀的干预作用，并探讨其可能的机制。 氧复氧处理，分别于缺氧2小时、复氧2、4、8、16小时收集所需标本，观察缺氧复 2．不同浓度的辛伐他汀(O．1、1．0、5．0、10．0lImol／L)以及10．0Itmol／L的 辛伐他汀+O．2 24 iNOSmRNA、eNOS蛋白表达的影响；3．用10．Oumol几的辛伐他汀预处理ECV304 小时后再行缺氧2小时、复氧2、4、8、1G小时处理，收集各时间段细胞培养液，观 I．0、10．0nmol几)以及10．OJImol／L的辛伐他汀+O．2mmol／L的甲羟戊酸 处理ECV304细胞24小时，收集各组细胞标本，提取总删A和胞浆蛋白，观察辛伐他 用ELISA法；检测培养液中NO的含量及NOS活力分别用硝酸还原酶法和化学比色法。 一苯酚一氯仿一步法提取细胞总RNA，纯度检验合格后，取总RNA做逆转录生成cDNA， 进行半定量PCR，产物经图象分析系统扫描评价各组iNOS和eNOS基因相对表达量； 丙烯酰胺凝胶电泳，再进行电转膜，用一抗和二抗进行免疫印迹反应，显色，图象扫 描分析，检测eNOS蛋白相对表达量。 p 时、复氧2、4小时PALl浓度明显增加(P均O．05)；5．0、10．0 mol／L辛伐缝汀 缺氧复氧对血管内皮细胞ⅡA、PAl．1、NO及NOS表达的影响及辛伐他汀的干预研究 中文摘要 浓度辛伐他汀预处理组与未经辛伐他汀预处理组相比对tPA的影响无明显差异(P均 10．0IX O．01)；经1．0、 mol／L浓度辛伐他汀预处理ECv304后再行缺氧复氧处理则 ECV304 予缺氧复氧刺激则各浓度组eNOSmRNA表达量较之无辛伐他汀预处理组均显著增加 10．0u (O．1、 1．0lamol／L组P均O．05， O．1、1．0、10．0p 预处理后则以上辛伐他汀的作用消失。4．缺氧2小时fNOSmRNA相对表达量明显减少 使iNOS相对表达量减少。 被甲羟戊酸逆转．2．缺氧及复氧过程中血管内皮细胞分泌NO减少、NOS活力下降， 辛伐他汀预处理可使缺氧复氧过程中内皮细胞增加分泌NO、增加NOS活力，甲羟 少，但复氧使之增加；缺氧及复氧均使eNOS蛋白表达减少，辛伐他汀可以阻止因缺 氧复氧刺激导致eNOS低表达和iNOS高表达，该作用可被甲羟戊酸逆转。 P^I一1NONOSRT—PCR 关键词辛伐他汀 缺氧复氧 血管内皮细胞tPA Westernblots 作 者：罗文平 指导老师：刘志华 lI 1kE恸0fS蚰啪由面∞轴嘞∞af帆．PAIl，N0锄|B叮荫姐醇呲毗岫剐岫hall删H蛐觚h由川曲嘶幽删瑚哪啊停n曲咖Absa缸 of onSecretionoft-PA、PAI．1、 TheEffectsSimvastatin in NOand ofnitricoxide cultured Expression synthase Endothelialcells Human