壳聚糖和DNA相互作用的研究及分析应用.pdfVIP

V01．30 第30卷专辑 南昌大学学报(理科版) Suppl of 2006年9月 Journal Science) NanchangUniversity(Natural Sept．2006 文章编号：1006一0464(2006)专辑一1085—02 壳聚糖与DNA相互作用的研究及分析应用 陈艳晶1，杨景和1，苏 震2 (1．济南大学化学化工学院，山东济南250022；2．山东大学化q!,fe,-r学院，山东济南250100) 摘要：对两类生物大分子一壳聚糖与核酸之间的相互作用进行了研究。在pH7．4Tris—HCL缓冲溶液中，DNA与 壳聚糖之间发生强烈的结合作用并使其共振光散射强度增加，增加的强度在一定的浓度范围内与DNA的含量成 正比，据此建立了核酸简单、快速、灵敏的测定方法。将其用于实际样品的测定，结果令人满意。文章讨论了各种 实验条件如pH值、缓冲溶液的种类与用量、壳聚糖的浓度、分子量以及离子强度、干扰离子的影响等。并用EB为 探针对两者之间的相互作用机理进行了探讨。 关键词：核酸壳聚糖定量测定相互作用 中冒分类号：0657 文献标识码：A 核酸是生物体内的一类重要大分子，核酸中储 UV一260紫外一可见分光光度计(日本岛津) 存着生命体的全部遗传信息，在生命的起源，生物的 HM一20E数字显示pH计 遗传变异，物种的进化等方面起着决定性的作用。 1．3实验方法 1．3．1 10 现代分子生物学的发展已证明，许多疾病的发生都 共振光散射测定方法 mL比色管中，依 与核酸的变化有密切的关系。壳聚糖(chitosan)为 甲壳素的脱乙酰化的产物，是唯一的天然存在的可 定容至10mL，振荡摇匀，然后在荧光光度计上以 生物降解的碱性多糖，具有无毒及良好的生物相容 入。。=入。。进行同步扫描(即△入=0)，可得体系的共 性。在自然界中广泛存在，是地球上仅次于植物纤 振光散射光谱。于最大共振散射峰400am测量体 维的第二大生物资源，在食品、生物、医学、医药等领 域有着广泛的应用，尤其是其在做为药物载体或缓 释材料等方面的应用研究愈来愈得到重视，因此，研 后的共振光散射强度)。 1．3。2 mol／L 究核酸与壳聚糖这两类大分子之闯的相互作用有着 荧光光谱分析方法 向含有10 重要的理论价值与实际意义。本文研究了核酸与壳 DNA，4 聚糖的相互作用，并在此基础上，提出了核酸方便、 同浓度的CTS溶液，在荧光分光光度计上以入。。= 535 nm一650 快速、灵敏的测定方法。 am测量体系在550 nm范围内的荧光 光谱。 1 实验部分 2 结果讨论 1．1试剂 CTS溶液(500pLg／mL)；称取0．025g壳聚糖定 2．1共振光散射光谱 容于50mL容量瓶中，稀释至刻度。 从体系的共振光散射光谱可以看出，在pH7．38 ctDNA ctDNA溶液(5