PAK4促进人乳腺肿瘤细胞G1S期转化机制探讨.pdfVIP

中华肿瘤防治杂志2015年 2月第 22卷第 3期 CHINJCANCERPRE ! 堡垒rr，February ! ． ． ·165 · 前《沿报道／论著 PAK4促进人乳腺肿瘤细胞 G1／S期转化机制探讨 李彦姝 张红艳 刘芙蓉 李丰 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室，教育部医学 细胞生物学重点实验室，辽 宁 沈阳 1i0001 【摘要】 目的 研 究 p21蛋 白激活激酶 4(p21proteinactivatedkinase4，PAK4)对人乳腺肿瘤细胞生长的影响。方法 人乳腺肿瘤细胞 MCF-7转染不 同剂量 PAK4真核表达载体或慢病毒敲除PAK4表达 ，收集细胞提取蛋 白进行蛋 白质印 迹法检测 PAK4和 CyclinD1表达。流式细胞仪检测 PAK4过表达和敲除后对细胞生长周期影响。结果 过表达 PAK4明显上调人乳腺肿瘤细胞 MCF-7中的CyclinD1蛋 白表达 ，引起 G 期细胞减少(从 80 下降到 55 )，导致G ／s 期转化细胞增多。慢病毒敲除人乳腺肿瘤细胞MCF一7中的PAK4表达降低 了的CyclinD1蛋 白表达，使G 期的细胞增 加 12 ，而 S期的细胞下调 7％。结论 PAK4调节 CyclinD1表达 ，促进人乳腺肿瘤细胞 MCF-7G1／s期转化 ，揭示 PAK4可能是重要 的人乳腺肿瘤 治疗靶 点。 【关键词】 乳腺肿瘤；p21蛋白激活激酶4；CyclinD1；细胞周期 ；慢病毒 、 中华肿瘤防治杂志 ，2015，22(3)：165～168 Mechanism researchofPAK4promotesbreastcancercellsinG1／sphasetransition LIYan—shu。ZHANG Hong—yan，LjU Fu—rong，LJFeng ResearchCenterofCellBiology，KeyLaboratoryofMedicalCellBiologyMinistryofPublicEducationofChina， ChinaM edicalUniversity，Shenyang 110001，尸．R．China [ABSTRACT] OBJECTIVE Toexaminetheinfluenceofp21一activatedkinases(PAK4)ontheproliferationofhumanbreast cancercellsMCF-7．METHODS HumanbreastcancercellsMCF-7weretreatedwithincreasingconcentrationsofPAK4con— structs，andwhole-celllysateswereextracted．LysatescontainingequalamountsofproteinwereimmunoblottedwithPAK4and CyclinD1antibody．Cellcyclewasanalyzedbyflow cytometryassay．InhibitingPAK4，byPAK4一RNAi-lentivirus，cellcyclewas analyzedbyflow cytometryassay．RESULTS TheincreasedexpressionofPAK4obviouslyupregulatedthelevelsofCyc— linD1proteinandshortenedG1(downfrom80 to55 )andacceleratedtheG1／S-phasetransition．Whenhumanbreast cancercellsMCF-7weretransfected witha shRNA—lentivirusagainstPAK4，thelevelsofCycl