独角莲超临界萃取物的GC-MS分析及体外抗肿瘤活性.pdfVIP

全国第三届药用植物化学与中药新药研发技术创新研讨会 独角莲超临界萃取物的GC-MS分析及体外抗肿 瘤活性 李庆勇‘，王春成，宋填，姜春菲，邱伟，曲震寰，何鸟娜 东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室，哈尔滨，150040 摘要：为了寻找独角莲抗肿瘤的活性物质基础，本文以独角莲块茎粉为原料，采用超临界c如 萃取方法进行提取，通过气相色谱一质谱联用技术对提取物进行成分鉴定。并采用噻氮唑蓝比色法 活性。结果C组分经鉴定为甘油，A、B两组分只是甘油含量不同，经GC—MS分析检出21种物质， 其中含量最为丰富的4种化合物依次为：邻苯二甲酸单(2一乙基己基)酯，占36．446％；亚油酸， 均有显著的抑制作用，且两组分抑制活性相似，肝癌SMMC一7721细胞对A和B组分都最为敏感，独 角莲块茎的超临界CQ萃取物确有显著的抗肿瘤效果。 关键词：独角莲；超临界C02萃取；GC-MS分析；抗癌活性 0引言 独角莲(TyphoniumEn91)为天南星科名贵中药材，俗称“疗毒豆”，其干燥块 giganteum 茎的商品名为“禹白附”。根据文献报道，独角莲在免疫调节、抑制酪氨酸酶活性、镇静、抗惊厥、 抗破伤风毒素、抗炎、抗菌、祛痰以及抗肿瘤方面有广泛的药理作用…，陈雪松等人从独角莲中分 离得到脑苷类化合物能够抑制钙激活氯通道¨。。21，但无抗肿瘤作用。其中关于独角莲抗肿瘤作用方 面的报道多是关于其水提物的啦’毛1。刘昕等人H1报道独角莲根茎的超临界提取物对人宫颈癌Hela细 胞有抑制活性。 鉴于独角莲抗肿瘤作用的物质基础亟待开发的现实，本研究采用超临界C02萃取技术对独角莲块 茎成分进行提取，并利用GC—MS对提取物所含成分进行了分析鉴定，同时通过细胞实验考察了提取 肝癌S姗C_772l的抗肿瘤作明，以期为探索独角莲块茎抗肿瘤作用物质基础及合理开发利用独角莲 块茎提供了科学依据。 1材料与方法 Ll材料、仪器及试剂 实验所用药材购丁二吉林省独角莲种植开发基地，为四年生根茎。实验所用仪器有JYL—A201九阳 天平(上海精科天平仪器厂)，HAl21-50一01型超临界萃取器(江苏南通华安超临界萃取有限公司)， He、Nz、Con(均购自哈尔滨黎明气体公司)，美国安捷伦GC-MSD 用仪，Stat 院细胞中心， 用10％RPMI 的样品时所用的甲醇为色谱级，其余试剂均为分析级，水为蒸馏水。 1．2超临界CO广夹带剂萃取 新鲜的独角莲块茎经去皮、洗净、切片、阴凉处自然风干(水分小于0．5％)，粉碎后过40目筛备 mL锥形瓶中，加入120mL 用。称取独角莲块茎干粉180g装于1000 8096乙醇溶液预浸三小时，装 于lL萃取釜，盖上烧结板拧紧，装入萃取筒。启动总电源开关，启动萃取、分离温控仪表并设置 掌E-mail．1 i—qingyong@163．com电话：0451- 龙江省基金(QC08C30)和黑龙江省留学基金。 21 全国第三届药用植物化学与中药新药研发技术创新研讨会 温度及其他参数(包括C02平均流量15kg·h‘)。启动制冷装置，使之保持在3-5℃之间，等温度 mL 达到设定值时打入100 80％乙醇溶液，之后适当调节各阀门使萃取釜内压力达到要求，待萃取釜 ldPa／50℃)时， 内的温度、压力都达到设定值(萃取压力／温度30MPa／45℃，分离压力／温度5 mL 打开阀门使流体进入分离釜中，同时开始记时，每隔50min打一次夹带剂(约10080％乙醇溶 液)，打入第四次夹带剂后再萃取90min基本上萃取完全。总萃取时间4h。萃取后从分离釜获得 的萃取液经旋转蒸发仪浓缩后放于-20℃冰箱中贮存。萃取率(％)=萃取所得