中外11个猪种NRP2基因BseM+Ⅰ位点多态性研究的论文.pdfVIP

第十次全国音禽遗传标记研讨会论文集 中外11个猪种RP2基因BseMI位点多态性研究? 刘德武，任广彩，陈德俭，杨关福，张细权‘ (华南农业大学动物科学学院广州510642) 摘要：研究采用PCR-RFLP技术，对中外11个猪种(杜洛克、长白．皮特兰、五指山、 I伐量 莆田、陆川、槐猪、蓝塘、玉山黑，二花睑和隆林)计334个样本的NI姓P2基因BseM 的多态性进行了分析。结果表明：长白猪和社洛克猪只有CC型，陆川猪只有TT型；瘦肉型 猪种中c基因频率较高，长白猪、皮特兰和杜洛克猪分别为1、0．9677和1，而地方猪种五指 山猪、莆田、陆川、槐猪、蓝塘、玉山黑猪、二花脸乖隆林猪C基因频率相对较低，分别为0．4516， 0．2258，0，n1667，0．5714，0．6774，0．5000和0．4000。 关键词：猪；NRP2；PCR-RFLP 猪的繁殖性状是养猪生产中十分重要的经济性状之一，尤其是中国地方猪种具有较高的繁殖效率， 已受到国内外研究者的广泛关注。随着分子生物学研究的深入，与猪的繁殖性状密切相关的候选基因和 标记已被应用于猪的分子育种实践。但不同品种中影响繁殖性能的主效基因可能不同。杜红丽(2005) 通过对猪的NRP2基因进行连锁不平衡分析、基因频率分析、基因定位以及基因的功能推断等研究认为， 其多态位点与产活仔数性状显著相关，可能是影响猪产仔性状(产仔数和产活仔数)的候选基凼之～。 发情期二花脸卵巢、子宫、输卵管中的表达量大于杜洛克猪相应组织的表达量，推测NRP2表达水平高 一些可能有利于提高产仔数，但非发情期表达差异不明显。目前，对猪NRP2基因的研究较少。本研究 进行NRF2基因BseMI位点的多态性检测，以探讨中外猪种间多态性分布情况，为进一步研究其对繁殖 性能的影响提供理论依据。 1材料与方法 1．1实验动物和试剂 计334个样本。 基因组DNA按常规方法抽提，实验所用生物试剂主要购自上海生物工程有限公司等。 1．2引物设计和PcR扩增 引物设计： 7。 CTCTGGCTGACAAGGAGAAG-37．Reverse：57-CGTCAGATGTG—(rGTGGGTG-3 PCR反应：10xPCR dNTP2 Buffer(M92+plus)2．5扯．，M92+1．5止，1．5mM0¨L，上下游混合引物0．5¨L’ 模板DNA Ex 12；止。TaKaRaTaqTM酶(Yd／aL)O，2皿、加ddH2019止，总体积为25皿。循环参数：94．o℃ ’基金项目：研究得到国家973项目(G2000016102)和国家自然科学基金资助。 作者l刘德武(1966-)，男，博士，副教授。主要从事分子遗传与动物育种研究。E-mail：dwliu@scau．educn edu．cn 通讯作者：张细权(1963．)，男，博士，教授。主要从事分子遗传与动物育种研究。E-medl：Xqzhang@scau No．1 Animal Bulletin (October2006)V01．10 Bioteclmology 保存。 PCR产物检测和酶切：经1％琼脂糖凝胶电泳检测，选择特异性强的产物用于酶切反应。酶切时取 I酶，然后放入5512烘箱中酶切过夜。酶切产物用 8¨LPCR产物，加入l皿10xTaqBuffer、0．5止BseM 2％琼脂糖凝胶电泳检测，以5～10V／cm电压电泳约25分钟，紫外透射仪E观察结果并用凝胶成像系统 进行拍照。 1．3统计方法 100％ 基因型频率(FAiAj)=(A