鸡包涵体肝炎过程中肝脏内T细胞亚群与IL-2、IL-6表达规律研究.pdfVIP

Note：“+”means “一”means positive， negative．病原学检测 受态细胞，经蓝白斑筛选挑取阳性重组质粒，经PCR鉴定在404bp处可见目的条带，片断 大小与预期相符。 2．4．3序列测定及分析目的基因测序结果与GenBank中的禽自血病病毒序列 AY013304．1 gil gbI l同源性最高为99．8％，有L个核苷酸的突变(第9位的A— G)，但氨基酸序列无变化；与gil 36个核苷酸的突变。 3讨论 AL／SV可引起禽类多种肿瘤性疾病，该病毒可诱发各种具有传染性的良性和恶性肿瘤，包括 淋巴细胞性白血病、成红细胞性白血病、成髓细胞性白血病、髓细胞瘤病、结缔组织瘤、 图6组织样品的RT-PCR扩增电泳图(Fig．6 ofPCR fromtissue Electrophoresisproduct sample， MarkenPCRMarker 1．肝脏2．肾脏3．脾脏4．肺脏5．阴性对照，Marker．PCRMarker1．1iver 2．kidney3．spleen contr01)· 4．1ung5．negative 上皮性肿瘤、内皮性肿瘤以及其它相关肿瘤，其中在自然条件下最常见的是淋巴细胞性白血 病(1ymphoidleukosiS，LL)。内皮性肿瘤包括血管瘤、血管肉瘤、内皮瘤和间皮瘤，文 献中血管肿瘤报道较少，仅日本阻3和以色列口1两个国家曾有关于该病的报道。在自然暴发的 病例中，血管肉瘤多引起6～9月龄的禽类死亡哺1。 本文所观察到的自然感染病例发病日龄为180-200天，送检7只病鸡的病理变化基本 相似。均可见皮肤、肝脏、脾脏的血管瘤样病变，肝脏汇管区、肺脏亦可见成髓细胞和淋巴 样细胞增生，可初步诊断为以血管内皮细胞增生为主的肿瘤性疾病，并伴随有成髓细胞性白 血病，这与文献报道相符瞄。。 从鸡分离的禽白血病／肉瘤病毒可分为6个亚群(A、B、C、D、E和J)，其中A和B亚 群在野外是常见的外源性病毒，C和D亚群病毒野外报道很少，E亚群包括极普遍的内源性 低致病力白血病病毒，J亚群是最近从肉鸡分离到的哺’。我们利用禽白血病A、B、C、D、E、 J亚型抗原ELISA检测试剂盒及A、B亚群抗体ELISA检测试剂盒检测7份血清样本，结果 证实鸡群感染了ALV，并且部分鸡出现病毒血症。 gag基因编码禽白血病病毒的的群特异性抗原，具有高度保守性，gag基因中p27基因编 码p27蛋白，p27基因序列高度保守。我们针对p27基因设计特异性引物，将扩增产物克隆并 测序，序列在GenBank中比较同源性最高可达到99．8％，表明病鸡组织中含有ALV的核酸。 综合病理学、血清学及病原学检测结果，我们可以证实该鸡群感染了ALV，并表现为以 内皮细胞增生为主的肿瘤性疾病。ALV与多种细胞类型的肿瘤病有关，但与本次检出的血管 瘤型肿瘤相关的株、型，还有待进一步的病毒分离、鉴定结果证实。 参考文献(References) 【1】乔彩霞，关云涛，陈洪岩．禽自血瘸研究进展【J】．动物医学进展，2003，24(6)：18．21 [2】吕荣修编著．禽病诊断彩色图谱【M】．北京：中国农业大学出版社．2004．117．119 【3】YM．Sail．禽病学(第ll版)[M】．苏敬良，高福，索勋，译．北京：中国农业出版社，2005．518．577 【4】韩静，陈晨，曹红，等．禽白血病病毒P27基因在原核细胞的表达及生物学特性的初步分析们．病毒学 。‘ 报．2005，21(4)：293-297 S．Johnson．．Detectionofavianleukosisvirusinalbumen [5】ThuyD．Pham,J．LloydSpencer,Eric ofchicken revelse chain ofVirologicalMethods eggsusing transcriptionp