脐血来源多能成体祖细胞体内外内皮分化潜能及细胞移植改善下肢缺血地研究.pdfVIP

—箍土二厘生鲎塞堕查速堂金这二； 成和储存的主要部位，透射电镜观察到了细胞浆 源的细胞分化为有功能的肝细胞，分化效率较单 中簇状糖原的沉积，细胞表面有微绒毛，这也是 独应用细胞因子高，这可能是由于体外添加的细 上皮细胞的一个特征，综合上述免疫荧光染色， 胞因子无论是种类还是数量终归很有限，无法与 透射电镜结果以及肝相关基因的表达，说明此细 体内的复杂调节机制相比拟。这就需要进一步分 胞已具备了肝细胞的部分特征，诱导4周虽然具 化机制的研究，才有可能开发新的诱导方案，有 备一些成熟肝细胞的标志，但仍然有一部分细胞 针对性的提高它的分化效率，大批量的生产可以 表达肝前体细胞分泌的蛋白AFP，这说明诱导的 用来移植的肝细胞才有可能成为现实。根据我们 细胞有一部分尚未完全成熟，需要更精细的微环 初步的研究结果。 境调节促进其进一步成熟。王韫芳等曾经模拟体 结论：脐血中的间充质于细胞，在合适的诱 内急性肝损伤的微环境在体外成功将大鼠骨髓来 导条件下，可以向肝样细胞分化。 076 脐血来源多能成体祖细胞体内外内皮分化潜能 及细胞移植改善下肢缺血的研究 中国医学科学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室 天津市脐带血造血干细胞库天津300020 徐燕 李云涛李长虹孟恒星 于珍韩俊领’李茜 邱录贵 目的：我们已经证明脐带血来源的多能成体 流灌注和毛细血管密度。 aduh cells， 结果：分化9天后倒置显微镜下观察细胞保 祖细胞(muhipotentialprogenitor MAPCs)在体外具有向间充质组织，如成骨、脂持贴壁状态，形态变化较小，胞体略缩短变宽， 肪以及神经细胞分化的潜能。本课题探讨脐带血 部分呈多角形、鹅卵石样；免疫组化显示诱导9 MAPCs的体内外血管内皮分化潜能以及移植内皮 分化前／后的MAPCs对缺血后肢血流灌注的影(cm44)；流式结果显示诱导后细胞继续高表达 响，为今后将其应用于临床提供相关的基础理论 和方法。 面抗原，部分开始表达内皮细胞标记KDR、 方法：收集健康产妇足月脐血，以密度梯度 离心法提取单个核细胞(mononuclearcells， 表达CDl4、CD45；激光共聚焦显微镜观察显示 MNCs)，利用已建立的分离和培养体系，从新鲜部分细胞具有吸收ac—LDL及结合UEA—l的能 脐带血中分离脐带血MAPCs，在体外经含有力；分化14天后激光共聚焦显示全部细胞均具 endothelial 10ng／nd血管内皮生长因子(vs略cli|ar有吸收∽一LDL及结合UEA—l的能力。此外， 诱导9天后细胞的增殖能力较分化前下降，倍增 growthfactors，rEeF)、2n【∥ml胰岛素样生长因 时间延长，处于Go／G。期的细胞相对减少，但仍 子(insulin—likegrowthfactor，ICF)、2％胎牛血 bovine 占75．5l％。分化前后的脐血MAPCs经局部肌肉 清(fetal serum，FBS)的培养基对第3代 注射移植到缺血后肢，结果显示移植后MAPc8 UCB—MAPCs进行诱导分化。分化后9天、14天 利用细胞形态学、免疫组化、流式细胞学技术、 或MAPE—EPCs均能够整合到缺血局部的毛细血 共聚焦显微镜等方法了解分化后细胞的特性。在 管。激光LDPI监测发现，移植后14天。DFl2 此基础上，我们建立了单侧后肢缺血的BALB／c 肢的血流比分别为34．