红景天、降香对实验性心梗大鼠血管新生与心功能的作用研究.pdfVIP

红景天、降香对实验性心梗大鼠血管新生 和心功能的作用研究 李剑范维琥施海明李勇罗心平 复旦大学附，焉华山医院心内科 通过鸡胚尿囊膜的研究，我科筛选出了数味促血管新生的中药，红景天和降香为其中作用较强 的中药。本实验拟观察观察大鼠急性心梗后2周、4周、6周的心功能改变情况及中药红景天、降香 煎剂灌胃对大鼠心功能的影响以及心梗大鼠6周时，通过及红景天、降香的干预，心肌内血管新生 香的促血管新生作用、其意义和可能的机制。 材料和方法 1实验动物：雄性SD大鼠240只，体重320±209，由复旦大学实验动物中心提供。 2主要仪器及试剂： 2．1主要仪器： VENTILATORHD一150； 小动物呼吸机：浙江大学医学仪器厂制造，出厂编号H221024，RODENT Machion电 V3．5分析软件，电脑预装；IMS细胞图象分析系统，医学图象分析软件， 脑，美国Apple公司；Chat 上海申腾信息技术有限公司 2．2主要试剂： 为l：50，货号为SC．316；VIII抗体，购自美国SantaCruz公司，稀释度为l：200，货号为A0082； TIE．2抗体，购自美国SantaCruz公司，稀释度为l：50，货号为SC．324； 3方法： 3．1中药水煎剂的制备： 红景天制备：红景天(景天科植物全瓣红景天全草，购自上海众益达国药房)250克，加入蒸馏 283． 降香制各：降香(豆科植物降香檀的根部心材，购自上海众益达国药房)250克，加入蒸馏水， 水量较红景天略少，因降香系挥发性药物，水煎时间10min，无菌纱布滤去药渣，水煎第二次，约5rain， 量与红景天相同。 3．2动物造模及分组： 左侧第四肋间钝性分离打开胸腔，轻轻挤压胸腔，剪开心包，暴露心脏，在肺动脉圆锥与左心耳交 界稍下l～2 mm处用无创性缝线结扎冠状动脉左前降支，然后逐层缝合胸壁，开胸前后即时记录II 导联心电图，以结扎部位以下心肌变白、搏动减弱且心电图出现ST段弓背向上明显抬高为造模成功。 分组：术后随机将造模大鼠分为模型组，红景天组，降香组。预灌红景天组：在进行造模前7天 开始预红景天灌胃；假手术组：开胸后在LAD穿线，但不结扎，直接关闭胸腔。取24只大鼠作为未 8组。 干预组，进行同步饲养。在各组内随机分为2周、4周、6周组，共设立1 3．3心功能测定： SYSTEM， 肤，小心钝性逐层分离出右颈动脉，经动脉置管，该管经压力转换器，接POLYGRAGH 并与生理记录仪相连。边送入测压管，边观察所引出的波形，提示进入心室后，固定测压管。待压 力曲线稳定15min后，用Apple电脑记录并分析dp／dtmax、LVP、LVEDP。 3：4免疫组化操作： u 大鼠心肌，常规脱水透明包埋和切片(4 m)：石蜡切片贴在涂有黏合剂的载玻片上，58℃烤 X X X 水洗。0．01mol／I、PH7．4PBS洗33rain；1％H202作用20min，PBS洗33min；抗原修复10min X ×2；PBS洗33mira X X 洗3 3rain；Envision试剂30rain，37℃：PBS洗3 洗，苏木素衬染30S，水洗，盐酸乙醇蓝化2秒，水