水泡性口炎的病理学的研究.pdfVIP

第27卷增刊 内 蒙古农业大学学报 V01．2702S 2005年7月 of Jul．2005 JournalInner MongoliaAgrlcukuralUniversity 文章编号：1009—3575(2005)02S一0014—02 水泡性口炎的病理学研究。 STUDY0NPATHOLOGY0FVESICULARSTOMATITIS 褚秀玲1．．．贺文琦1。陆慧君1。 高丰1 (1． 吉林大学畜牧兽医学院，长春130062；2，河北北方学院动医系，张家口075131) 摘要： 本实验利用光电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪以及免疫组织化学染色等技术对水泡性口炎的发 病机理进行研究。 关键词： 水泡性口炎病毒；超徽结构；细胞凋亡；免疫组化 水泡性口炎(vs)是1种感染马、牛和猪的水泡性传染病，人也可自然感染…。其病原是弹状病毒科的 代表毒种水泡性口炎病毒(vsv)。由于VsV具备在大多数传代细胞中增殖、基因结构简单等优良特性，已 经被改装成多种病毒载体。而且vsv具有干扰素诱生特性，在体内外对于扰素缺陷的肿瘤细胞具有选择性 溶解作用[”。因此。对vsv致病机理的研究，将有利于本病的监控和新的vsv抗肿瘤制剂的研制。 1材料与方法 1．1材料vsv和BHK一21细胞由本室保存。 1．2 vSv感染BHK一21细胞的超微结构观察 拍照。 1．3 vSv诱导BHK一21细胞的凋亡 一21细胞凋亡的情况。 1．4 vSv人工感染小自鼠的免疫病理学研究 学观察。 2结果 2．1 vsv的形态发生与宿主细胞的超微结构变化 通过超微结构观察，初步弄清了病毒对细胞的侵袭过程，即vsv在BHK～21细胞的胞浆内复制，从细 胞膜上获得囊膜，最后通过出芽释放到细胞外，同时vsv的复制可导致BHK～21细胞染色质凝集边聚，细 胞浆严重空泡化，膜性细胞器空泡化，细胞变形而裂解死亡。 2．2 VSV诱导BHK一21细胞凋亡 聚集于核膜旁，形成半月状，感染后期可见核破碎，凋亡小体形成。 透射电镜观察，细胞染色质凝聚，集于核膜旁形成典型的新月形，细胞浆中出现大量的空泡，感染后期， 细胞核碎裂，凋亡小体形成。 提取VsV培养物的总DNA进行琼脂糖凝胶电泳出现了凋亡特有的梯形条带；流式细胞仪检测到了凋 ’嚣薯品羿：2措00秀5琦-0(619-7020一)，女．河北盘化人．讲师．在壤博士．研究方向为兽医窘理学与中兽医学 增刊 褚秀玲等：水泡性口炎的病理学研究 15 亡细胞特异的亚G1凋亡峰。 2．3病理组织学观察 观察显示，VSV能够感染小白鼠，感染早期病变主要在肺部，感染后期病变主要在脑部和脊髓。 2．4免疫组化染色结果 在小白鼠的肺、脑和脊髓部发现了阳性细胞，在病毒感染后期，阳性细胞数量增多，在其他组织中和对照 组肺、脊髓、脑部未发现阳性细胞。 3讨论 3．1关于vSv在BHK一21细胞内的增殖过程 VSV对细胞的感染是通过静电作用吸附到细胞膜上的，然后通过内吞噬作用进入靶细胞内[3，…。结合 在细胞浆中进行复制和合成病毒蛋白质；(2)病毒蛋白在细胞膜内表面进行装配，并通过细胞膜出芽获得囊 膜；(3)病毒从细胞膜出芽释放到细胞外或进入相邻细胞。 3．2 VSV诱导BHK一2l细胞凋亡的机制初探 单独可以诱导细胞出现凋亡，并且M蛋白诱导凋亡和其能抑制宿主基因表达有关[7】。但在对凋亡机制的研 究中，有学者发现许多病毒都能合成或具有类似凋亡级联反应中的某种成分．即病毒被认为是模仿凋亡过程 中的某种成分而抑制或促进凋亡的【8j。 3．3关于VSV在鼠体内的感染途径 有研究已经证实，VSV可以通过仔猪完整的黏膜感染，但对于牛却不能通过完整的黏膜感染。对于鼠， VSV主要引起中枢神经损伤，可以沿着神经顺行或逆行传播[9’1…。本实验证明，病毒主要在感染小白鼠的 脑部和肺部复制。并引起相应的病理变化。 参考文献： [1]PormerA．Webst盯RG，Be