放射免疫法检测优福金血药浓度的研究.pdfVIP

中单芮 ChineseTraditionalandHerbal ·141· Drugs第37卷增刊2006年 放射免疫法检测优福金血药浓度的研究 曾 勇1，张莉玲2，王美中2，王衍真2，陈拯民1 (1．天津药物研究院，天津300193；2．中国原子能科学研究院，北京102413) 摘要：目的建立放射免疫检测血清中优福金的方法。方法采用竞争性放射免疫法，即用一定量的125I一复合干 扰素和待测样品与兔抗复合干扰素抗体共孵，然后加入分离剂离心，测定与抗体结合的125I一复合干扰素量，数据经 400 四参数程度进行拟合。结果在200～14 pg／mL时药物浓度对数与B／Bo呈Logistic线性相关。优福金质量浓 255．7 度在392～2 pg／mL，平均相对回收率为(107．7士0．9)％。用本方法测定高、中、低浓度血清样品的批内变异 为5．0％～7．7％，批间变异为6．7％～10．5％。在标准曲线浓度范围内，稀释样品对测定结果影响不大。本方法对 验建立的放射免疫法从回收率、精密度及灵敏度等方面均能符合新药药动学的要求。 关键调：优福金；放射免疫法；药动学；戚药浓度 优福金是深圳九先生物工程有限公司生产的一 衷l 放射兔疫法检测优福金的操作步曩 Table1 Procedureof ofYFJ 种由166个氨基酸组成的新型复合a干扰素(相对 radloimmunltyassay 分子质量为19000)，是把多种亚型a干扰素结构中 最常见的氨基酸序列选出排列成一复合序列后，以 基因工程技术生产出来。动物药效学实验证明其具 有明显的抗病毒活性。目前国外上市的同类产品为 美国Amgen公司生产的Infergen。本实验研究了采 用放射免疫检测优福金血药浓度的方法。 200、 金溶液，使终质量浓度分别为200、450、1 1材料 400 3600、7200、14pg／mL，按上法测定cpm值，每 1．1 药物及主要试剂：优福金注射液(YFJ)：深圳个质量浓度平行做两管，取平均值。采用计数仪内附 九先生物工程有限公司提供(批质量 带的软件，经微机选用四参数程序进行拟合后，即可 浓度2肛g／mL)，温育液：含1％牛血清白蛋白得标准曲线。每批试验均应制备一条标准曲线。 (BSA)、0．025 PBS mol／LEDTA的0．05mol／L 2．3 回收率和精密度：用空白血清将优福金注射液 (pH7．4)。”5I一复合干扰素：用温育液稀释至约稀释配成高、中、低3个水平的血清样品，按上述方 200000 cpm／mL。复合干扰素抗体(兔)：用含法进行测定，根据同批标准曲线计算血药浓度，并计 0．04％正常兔血清的温育液稀释至l：35000。分 算测定方法的相对回收率及批内、批间精密度。 离剂：含4％PEG6000，6％驴抗兔第二抗体及2．4健全性：将高质量浓度样品用生理盐水倍比稀 mol／L 7．4)。 0．8％正常兔血清的0．05 PBS(pH 释后，用上述方法测定各级稀释液，考察在标准曲线 1．2仪器：GAMMA—C127计数仪，DTC公司产 质量浓度范围内，稀释样品对测定结果是否有影响。 品(附数据处理软件)。 2 方法