DNA场效应晶体管传感器的研究.pdfVIP

kptamer在生物传感器中的应用 复变性和复性，可用许多方法对aptamer进行再生，如加热、改变盐的浓度、改变pH或加入 螯合剂等，极端的条件也不会破坏aptamer，但极端pH应避免，以免aptamer水解。再者， aptamer容易被修饰，便于固定在传感器的敏感膜上，将核酸固定在不同表面的方法已经十分 成熟，操作简便且重复性很好，在aptamer的化学合成中可以加上一个连接臂，这样可以精确 可以设计多种检测方法，将荧光球附着在aptamer上，当aptamer与靶分子结合时，荧光球的 荧光特性将会改变， SELEX技术的另一个重要优点是可以通过改变SELEX过程中的条件而改 变aptamer的特性，例如，含有荧光球修饰的随机寡核苷酸库能筛选出具有特殊荧光特性的 aptamer，这种aptamer能很好的应用于传感器上。 3．Aptamer传感器的应用 最近，aptamer己被应用于多种亲和传感器。最早的将生物素化的识别L一腺苷的RNA 液中的结合特性一致。该传感器具有很高的手性分辨率，它对L一腺苷的亲和力是R一腺苷的 1700倍‘…。 hptamer标记上各种报道分子，从而提高检测的灵敏度。例如有研究者。31将抗可卡因的 aptamer一端标记上荧光，另一端标记上荧光萃灭基团，制成分子灯塔生物传感器，如下图。 当没有可卡因存在时，分子灯塔折叠成发卡状发卡状，aptamer荧光基团所发出的荧光将被淬 灭基团所淬灭，有可卡因靶分子存在时，可卡因与aptamer结合，环状结构打开，淬灭基团被 移开，原来没有荧光发射的灯塔分子将发射出荧光。通过测定荧光强度，来检测溶液中可卡因 M。 的浓度，该传感器适用于检测各种介质中的可卡因，灵敏度达10u 甜em 啦暴 阿啼口 7 可卡因分子灯塔传感器。5F为荧光标记，3’为dabcyl淬灭剂 可卡因分子结合与否灯塔荧光变化转换示意图 利用识别凝血酶的aptamer构建了检测凝血酶的消失波荧光异向性传感器“。，aptamer 的5’端用荧光素标记，3’端用烷基氨标记以便附着在玻璃表面。当传感器表面有凝血酶 时，由消失波激发的荧光偏振就会发生改变，凝血酶生物传感器的检测范围在140pL的样 本中检测0．7—700 amoles的凝血酶。这种传感器的优点是不需对待测靶分子进行标记， 因此可用于体内测量，这种传感器具有很高的特异性，它仅对凝血酶有响应，而对待测溶 液中的胰肽酶则没有响应，而杂乱的DNA用荧光素标记后固定在传感器表面上则对凝血酶 没有响应，这说明该传感器是在aptamer与靶分子特异性结合的基础上响应的，该传感器 有很好的重复性，将表面的aptamer变性后即可将结合的凝血酶去除，传感器可重复使用。 还有另一种检测凝血酶的aptamer传感器“1。将抗凝血酶的DNA aptamer固定在硅胶微球 表面，然后将这些微球放入像导纤维一端的微孔中，另一端连上落摄荧光显微镜。将含有 第八届全国敏感元件与传感器学术会议论文集 aptamer珠子的一端与荧光标记的凝血酶孵育，通过竞争结合分析法来检测未标记的凝血 酶。Aptamer珠子生物传感器可特异的结合靶点，且可重复利用，检测历时短，速度快，有 很广阔的应用前景。 另一个尚未探索的aptamer在传感器方面的应用是aptamer结合的电化学检测，由于 aptamer是多聚阴离子，当与靶分子结合后，其导电性将发生改变，电荷在核酸双螺旋中的 转移规律是一个热门的研究领域，虽然这一研究仍处于起步阶段，但具有巨大的应用潜力， 目前电荷转移仅限于纯的DNA范围内，但不久的将来将会研究DNA与其他分子相互作 用对的电子转移规律。Aptamer的应用也将随着这些新发现而进一步扩大。 总之，aptamer生物传感器具有其他类型传感器不具备的独特的性能，使得传感器应用