糖苷酶及其在糖基化合物改性中地研究.pdfVIP

第八届全国工业生化与分子生物学学术大会论文集 大会主题报告 糖苷酶及其在糖基化合物改性中的研究 李春冯世江 (石河子大学化学化工学院生物工程系，石河子市832003) 摘要z综述了糖苷酶的分类及催化机理，以及糖苷酶在糖基化合物改性中的应用，同 时研究了3-D．葡萄糖醛酸苷酶在甘草酸糖醛酸基改性中的应用，并提出了糖苷酶在糖基改 性中的研究策略． 关键词：糖苷酶，糖基化合物，改性 各种含糖化合物(包括单糖苷、寡糖、多糖、皂甙、糖蛋白等)中的糖苷键，生成单糖、 寡糖或糖复合物的酶。 糖基化台物又称糖苷类化合物或配糖体，是糖或糖的衍生物如氨基糖、糖醛酸等与另 一非糖物质通过糖苷键连接而成的化合物，其存在形式主要有单糖、多糖、皂甙类化合物、 糖蛋白等。作为自然界中一类重要的化合物，在生物、医药、食品等领域均有着广泛的利 用价值。近年来，随着对该类化合物的深入研究，许多糖基化合物需要经改性后才能能满 足人们的要求，而糖苷酶在这一任务中无疑将扮演重要角色，也是即核酸、蛋白质之后研 究的又一广阔的生命与健康的研究领域，因此，近年来利用糖苷酶对糖基化合物的糖基定 向改造工程成为一个研究热点．本文将围绕糖苷酶的分类、机理、糖基化合物生物改性的 研究现状进行了综述，并提出了糖苷酶在糖基改性中的研究策略。 1 糖苷酶的分类及折叠方式 糖瞢酶有多种分类方式：(1)按水解底物来命名的传统分类法，如水解B—D．葡萄糖苷 方式分类，可分为内切型和外切型；(4)按氨基酸序列和三维结构的相似性来分类的系统 (Henrissat 酶之间的相互进化关系。同时，通过结构和功能的比较，还可以获知糖苷酶的活性中心(或 者功能区)和维系其三维空间稳定的区域等，为获取活性更高、稳定性更强、底物特异 性更强等特性优良的糖苷酶提供理论基础．因而。该种分类方式目前被广泛采用。 根据最后一种分类方式。糖苷酶目前分为67个家族。许多糖苷酶家族的三维结构被 测定，发现活性结构域的拓补学构象只有三种。它们各自有一样的折叠方式和相同的催化 or 象，口袋的深度和长度决定于底物和酶结合基团的长度：(2)裂隙式(Clegtgroove)： 大会主题报告 第八届全国工业生化与分子生物学学术大会论文集 开放结构，随机结合多聚长链多个糖单位，一般是内切酶，如溶菌酶，淀粉酶等：(3)隧 道式(Tunnel)：像纤维二糖酶是对一个长链纤维素分子进行攻击，它们的结合部位处于隧 道中柳。 2糖苷酶催化机理 糖苷酶的活性中心由两个羧基残基组成。其催化作用是通过与糖苷化合物的异头碳形 成正碳离子中间体，然后离去完成反应。糖苷键的催化机理有两种：反转和保留方式，它 们分别指在糖苷酶与糖苷物形成正碳离子后的离去方式，糖苷化合物的异头碳是否发生构 象改变，如果发生改变称为反转，不发生改变称为保留。在反转方式的糖苷酶中，活性中 心的两个羧基残基之间的平均距离大约为loA(士2 A)，它们分别作为酸或碱催化，只需 一步置换即可裂解糖苷键完成水解反应(Fig．1a)。在保留方式的酶中，活性中心的两个 羧基残基之间的平均距离大约为5．5 A，糖基和酶形成了反应过渡态，在酸碱催化的协助下， 经过两步置换。完成催化水解【¨(Fig．1b)． 至至 煎亟至 习习习 Enzymatic ofthe bond Fig．1 hydrolysisglycosidic 3糖苷酶在糖基化合物生物改性中的应用 3．1在天然产物改性中的应用 许多天然生物活性分子是糖基化合物或称糖缀合物，在对人类疾病的治疗中具有重要 的药理学意义，但令人遗憾的是天然型野生的植物中，大量的糖苷类化合物往往不是其生 物活性最佳的分子形