酸枣仁皂甙A对脑缺血再灌注损伤大鼠神经保护作用地研究.pdfVIP

中国·南宁泛申医论坛·思考中医2007论炙集 酸枣仁皂甙A对脑缺血再灌注损伤大鼠神经保护作用的研究 陆晖陆艳玲吴云虎熊瑜王凯华 (广西中医学院附属瑞康医院神经内科，广西南宁530001) 嘴要】霹的探讨酸枣仁皂甙A对脑缺血再灌注损伤大鼠神经保护作用及其作用机制。方法96 只∞大鼠被随机分为假手术组、缺血再灌注模型组、趸莫地平愆和酸枣仁皂甙A组，除假手术组 模型组及假手术组给予等体积生理盐水腹腔注射。造模后按时点断头取脑组织切片行谷氨酸免疫组 化及原位细胞凋亡检测。结果造模后12h缺血脑组织中心区可见太量谷氨酸阳性细胞及凋亡神经 元细胞，48h达高峰，7d后明显减少；尼莫地平及酸枣仁皂甙A组二者数量较模型组明显减少。结 论酸枣仁皂甙A能抑制脑组织谷氨酸免疫组化阳性细胞的表达、减少神经元细胞的凋亡，在脑缺 血急性期具有脑保护作用。 【关键词】酸枣仁皂甙A脑缺血褥灌注谷氨酸免疫组化细胞凋亡 中药黢枣仁为鼠李科枣属橇物黢枣翡干燥 假手术组外，各缀分设12h、24h、48h、4d秘 弹子，其有弓。心安神、盏勰敛汗之功效，研究发 7d五令对闯缀，每个时闯组§只大鼠。(2)选 现酸枣，f■皂甙A为酸枣事：於主要潘性成分之一 模：各缓模谶铡镪均参照改良的Zea Longa¨3线 “1，其有钙拮抗及抗动脉粥样硬化等作用他删。 栓法。用尼龙鱼线栓塞左侧大脑中动脉，造成赢 由于动脉粥样便化以及细胞内Ca2+超载与缺血侧大脑中动脉阻塞模璎，于造模2h后拔线实现 性中风的发生发展有着密切的联系，故本实验将 再灌注，假手术组不插线。 模型成功的判断： 酸枣f“：皂甙A引入中风领域的研究，通过建立脑 动物清醒后，右侧出现霍纳征：右眼虹膜颜色变 缺血掰灌注损伤大鼠模型，观察酸枣仁皂甙A 浅，眼睑下豢，眼裂变小，瞳孔缩小，左前肢出 对脑缺盎褥灌注损伤j蠢大鼠谷氨酸兔痰缀化阳 现腕肘矮曲、魔内旋，或有不停向左侧转圈j}ll跌 性细魄豹表达及原位细胞潺亡的影响，叛探讨其 倒等神经症状。黠造模不藏功大鼠予以剔除，并 在脑缺簸惫性期|{冬享枣经元僳护作蠲机铡，必该药 随机补充。(3)给药方法：酸枣仁皂甙A缀给予 在脑缺斑早期的治疗提供实验基磷。 酸枣t：皂甙A 20mg／kg腹脏注射，尼莫地平组给 1材料与方法 予尼莫地平注射液lmg／kg腹腔注射，模型绲及 1．1材料 假手术纽给予等体积生理盐水均作腹腔注射。各 1．1．1健康雄性SD人鼠96只，SPF级，体重组于术前30min给药一次，术后仍按上述剂鬣给 药，一天一次。 2002509，由广西药品检验所实验动物中心提 供，许可证号：SCXK桂2003-0001。(2)酸枣仁1．3标本奄切片的制备 皂甙A粉：盘成都天福堂经济有限公翊生产，纯 大鼠造模聪，分剐按12h、24h、48h、4d帮 度／98％，耀时以0．鹪生理盐水配成矮裁浓度为 腹靛深麻醉，尔焉御卧德嗣定予手本台，暴薅心 2mg／ml；藩莫缝乎注射液：由浙江一耨露l药股份 有限公溺生产，批号用时以0．9％脏，崩连接有注射器的磨钝的lO号针头刺入左 心室，迅速剪开备心耳：以O．9％生理盐水200ml 生理盐水配成质耸浓度为0．1mg／ml。(3)原位 细胞凋亡试剂盒、谷氨酸一抗、SABC试剂盒： 快速滴入冲去全身血液，4％多聚甲醛磷酸盐缓冲 均由武汉博士德生物：]二程有限公司生产。 液灌注同定，先快后慢，灌注过程可见大鼠四肢 1．2造模及给药方法 抽搐、肌肉颤动，滟注30--一45min后