三种氟喹诺酮类药物在鸡组织中残留地微生物法检测研究.pdfVIP

·342· 食品安众的理论与实践 三种氟喹诺酮类药物在鸡组织中残留的微生物法检测研究 祁克宗1，涂健，’邢应寿1，束良强2 (1．安徽农业大学动物科技学院，合肥，230036；2．安徽省兽医工作总站，合肥，230036) 撼要：本研究以失肠杆茵、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆茵、藤黄微球茵四种茵为工作茵，用微生物杯碟法检 测诺氟沙星、恶诺涉星、环丙沙星及英蠢静药耪混合物在鸡组织中鳃残餐。首先通过量赞药物在磷酸楚缓冲液、瓤 肉、释簸和肾驻中最低徐测限的测定确定该方法所能遮到精确度，初步证实该方法的可行檀；然后通过对其标准辩 线的制备，综合三种药物的浓度对数与抑茵圈直径的线性关系，得出各自的线性回归方程与相关系数。通过回收率 的测定，验证该研究方法的可行性。最后根据标准曲线，利用抑茵圈直径太小与药物浓度对数成正比的原理，检测 出不同时阊三种药物及英混合物在鸡级织中砖残留。结果表嚷，肉仔鸡单次内服环遗沙星、诺氟沙星、恶诺沙星及 英三种药物混合耪，琢藩沙星在24h态还毙准璃裁定截，残留量较大。雨对于茵静，蒜黄微臻菌检测嚣雨沙星、诺氟 沙星、思诺沙星及其量种药物混合物较为敏感，基本能检测三种药物及其混合物在幂同时间内的残留，可作为微生 物方法检测氟喹诺酮类药物的优良茵种。对于常见的混合用药，肉仔鸡内服三种药物混合物24h后，除枯草芽孢杆 菌在1h、2h内未检测到，其他菌种均可检澳l到三种药物，且肾脏中的残留均大于肌肉和肝脏。 关键词：诺氟沙矍；恶诺涉星；嚣涎涉星；痰鸠；微巍耪凑 1．前言 为了预防和治疗动物的疾病，使用药物是无法避免的。但是不合理给药，违禁药的使用，不适当的休药期以及 动物的私自屠宰，导致了食品中药物残黯的危害，尤其肉类、蛋类及乳晶内的药物残醑成为影响人类健康更成为最 力严重瓣问题[1】。药物残餐薛检验成隽控制药物残鍪的关键。本簪}究采震的是孛国药典上所采爰的挽生素譬臻琼 脂扩散微生物检测法，剽雳抗生素在摊布特定试验菌的固体培养基波垒球面形扩散，形成含一定浓度抗生素球形 区，抑制了试验菌的繁殖而呈现出透明的抑菌圈的规律，根据抗生素在一定浓度范围内，对数剂量与抑菌圈直径(面 积)呈线性关系，通过比较标准品与供试品产生抑菌圈的大小，计算出供试品的效价[2】。微生物方法擞然不能作为 兽药残黧的准确定性鞠定量分析。但它的前处理簿单，并同时能筛选大塞的样品，适用于分析药物残罄的初步筛选， 戈其在海关进窭疆上对药物残瞽的及时监控是菲常骞必要的。 2．实验材料与方法 2．1 实验动物 AA肉鸡：购自安徽省凌种鸡场 2．2 纛辩与试麓 菌种 药品监察所 撬号H010197)；魏自巾圉善药蓝察所 2。3 菇养基 培养基l：蛋白胨59、牛肉浸出粉39、琼脂15-,209、磷酸氢二钾39、蒸馏水1000ml 铎1．329、蒸馏求1000ml 培养基Ⅳ：蛋白胨69、牛肉浸出粉29、酶母浸出粉29、葡萄糖39、琼脂15---209、蒸馏水1000ml 营养琼脂培养基：蛋白胨109、氯化钠3．59、琼脂15--V209、肉浸液1000ml 2．4实验方法与内容 2．4．1三种药物及其混合物豹爨羝检嚣限测寇 食品安全梭测技术 ·343· ml。112 0。20弘g／ml的标准溶液为标准品参照浓度工作液 ml。以0．10肛g／ml的标准溶液为标准品参照浓度工作液 蕊。1：2 0。10弘g／m|的标准溶液为标准品参照浓澄工作滚 (4)诺一憨一环混合物：取诺一恩一环混合物的贮存标准液用1％磷酸盐缓冲液稀释成药物含量为0．80、0．40、 0．20、0．10、0．05肛g／ml。以0．20“g／ml的标准溶液为标准品参照浓度工作液 分别用大肠杼菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌分别做抑菌试验，测定各浓度诺氟沙星所产生的 簿菌匿直径，泼产生明显{霉蘩瀚(透常{霉菌露嶷径超过10ram)酶最奎浓度秀凌。 另取空融组织加入已知爨标准品，处理同两收率测定。用上述四种菌分别做抑菌试验，测定空白组织中各浓度 诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙盛和该三种药物混合物的抑菌圈盥径，以产生明姓抑菌圈的最小浓度为最低检测限 2．4．2 篡种药物及其混合物标准曲线的绘制 分舅l将诺籁沙星、愚诺沙基、螺嚣沙星、诺