微生物絮凝剂产生菌的筛选和其培养条件研究.pdfVIP

微生物絮凝剂产生菌的筛选及其培养条件研究 刘从彬赵继红。李佳 (河南工业大学化学化工学院环境工程系，郑州450051) 摘要z用常规的分离、纯化方法，从郑州市五龙口污水处理厂活性污泥中分离筛选出8株产絮凝剂的菌株，复筛得到l株絮 凝活性较高的微生物絮凝剂产生菌，编号为127#。测定其发酵液对高岭士悬浊液的絮凝率，得到该菌产絮凝剂的适宜培养基 及培养条件如下：蔗糖20 率达到90％以上。 关键词；筛选；微生物絮凝剂；培养：絮凝活性 引言 絮凝剂是一种应用广泛的水处理药剂，可使水中不易沉淀的固体悬浮颗粒凝聚沉降。目前应用的絮凝 剂可分为无机高分子絮凝剂、有机高分子絮凝剂和天然生物高分子絮凝剂。长期实践证明，无机絮凝剂和 有机絮凝剂都存在一些缺陷：无机絮凝剂由于用量大，易产生二次污染【ll：有机高分子絮凝剂本身虽无毒 性，但合成它们的单体是有毒的，并且有机絮凝剂在生产和降解过程中释放的污染物会严重危害人体健康 [21。微生物絮凝剂是由微生物产生的生物大分子物质，已知的微生物絮凝剂有糖蛋白、多糖、纤维素和DNA 熊【3·51 吖 。 微生物絮凝剂有良好的絮凝沉淀性能，安全，无毒，可生物降解，对生态环境也不会产生不利影响。 与目前普遍采用的天然高分子絮凝剂相比，微生物絮凝剂的种类多，生产快，因而具有广阔的发展前景【¨l。 1材料与方法 1．1材料 菌种来源：郑州市五龙口污水处理厂活性污泥。 1．2方法 采用稀释涂布分离法进行菌种分离。污泥和污水经稀释、稀释涂布分离获得单菌落，纯化后编号，用 得培养液进行絮凝活性的初步测定。 1．2．1初筛 在1000mL烧杯中加入浓度为49／L的高岭土悬浊液800mL和2mL 培养液，快速搅拌3分钟，静置。以能否使高岭土悬浊液絮凝沉淀为指标进行初筛19J。目测，使高岭土悬 浊液絮凝成大颗粒沉淀物的为有絮凝活性的菌株。 1．2．2复筛 0’1 1J： 速为150r／rain摇床中培养72h，所得培养液进行絮凝活性的测定。其方法为【l 空白为对照来确定培养液的絮凝程度。絮凝活性用絮凝率来表示，并用下式计算絮凝活性。 100％ 絮凝率=“A．B)／A)X 式中，A为对照上清液550hm处吸光度；B为样品上清液550nm处吸光度。 1．3培养条件实验 1．3．1生长曲线的测定：调节摇床培养温度300C，转速150r／rain，改变培养时间，从0开始，每12h测一 次絮凝率，测定菌株180h以内的絮凝活性，找出最适的培养时间。再在所找出的培养时间周围作具体时 间的优化，找出较为准确的最适培养时间。 ‘作者：赵继红，河南工业大学，Tel．1 3683828947；e：mail：zhaojihong@hauLcdu．clrl 项目支持：郑州市科技攻关计划项目(052SGYS31193) 。C、350C、400C，培养后，测定菌株的絮凝活性。 1．3．3耗氧量对菌株絮凝活性的影响：设置摇床转速分别为50r／min、100 300r／min，培养后测定菌株的絮凝活性。 10．0、12．0，培养后测定菌株的絮凝活性。 1．3．5碳源的选择：分别以乳糖、淀粉、麦芽糖、纤维素、果糖、葡萄糖、乙醇等代替筛选培养基中的蔗 糖做碳源，其余成分不变，培养后测定菌株的絮凝活性。 1．3．6碳源用量对菌株絮凝活性的影响：保持培养基中其他成分不变，改变培养基中的碳源加入量，分别 为09／L、109／L、209／L、309／L、409／L、509／L、609／L，培养后测定菌株的絮凝蘑性。 1．3．7氮源的选择：分别以牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、谷氨酸、尿素、硫酸铵等代替筛选培养基中的硝酸 钠做氮源，其余成分不变，培养后测定菌株的絮凝活性。 1．3．8氮源用量对菌株絮凝活性的影响：保持培养基中其他成分不变，改变培养基中的氮源加入量，分别 #J09／L、0．5∥L、1．09／L、1．59／L、2．09／L、2．59／L、3．09／L，培养后测定菌株的絮凝活性。 1．3．9无机盐的选择：保持察氏培养基中其