牙根发育与再生的研究.pdfVIP

3—15 出来，组成牙上皮结构并导致形成发育良好的牙齿结构。这些结果表明，在E1 的小鼠磨牙牙胚中，尽管已经出现基因表达的不对称性和明显的组织形态结构，但将 其打散重聚后仍具牙齿发育能力。牙齿发育的这些特性使得对其进行基因水平的操作 变得极为简便。同时由于牙胚细胞可以自发地聚集并形成特定的牙齿结构，因此可以 认为，如果能在有关千细胞中启动与诱导牙齿发育能力有关的基因表达谱和信号通路， 干细胞可以形成再生牙齿。牙齿发育的这些特点对发育机制的研究和利用于细胞进行 牙齿再生的研究具有重要的意义。 基于牙齿发育的这一特性，我们建立了利用Lentivirus表达系统进行功能基因的 RNAi和过表达技术，能够在器官水平上对牙齿的发育进行基因功能的缺失和获得(gain offunctionand loss offunction)的研究。我们也进一步利用细胞重聚和嵌合体 组织重组方法，对表皮干细胞、牙髓干细胞和骨髓基质干细胞进行牙齿再生的尝试。 研究结果表明，这些干细胞能参与牙齿的发育，形成牙齿结构。 牙根发育和再生的研究 文玲英 第四军医大学口腔医学院西安710032 emai1：Peosh国fmmu．edu．cn 牙齿发育是在外胚层来源的上皮和神经嵴来源的间充质细胞相互作用、相互诱导 下完成的，牙根发育是牙胚发育不可缺少的部分，目前，对牙根发育的了解远不如对 牙冠发育的了解，很值得进一步研究。 牙齿发育是个连续过程，-3牙冠发育即将完成时，成釉器形成Hertwig上皮根鞘 thelialroot epi sheath，HERS)，从而开始了牙根发育。 (Hertwig’S 1．牙根发育的启动 颈环干细胞中的中间层细胞消失并形成2层上皮结构的HERS，拉开了牙根发育的 序幕。HERS是启动牙根发育的形态学信号，HERS、牙乳头和牙囊细胞三者共同形成牙 根发育的器官原基。 1R 2．牙根牙本质的形成 HERS与成釉细胞不同，为双层类似立方状细胞，最初细胞间紧密相连，基底膜完 整，通过启动细胞内生长因子和转录因子，促使与基底膜相连的牙乳头细胞极性化并 逐渐分化为成牙本质细胞，分泌前期牙本质，随后基质矿化为根部牙本质。 3．牙根牙骨质的形成 目前认为，当根部牙本质初级矿化形成后，HERS开始断裂，牙囊细胞胞分化为 成牙骨质细胞的前体细胞，分泌牙骨质基质，而该前体细胞接触到前期牙本质和牙骨 质基质后，分化为成牙骨质细胞，形成无细胞牙骨质。当牙根发育完成约2／3，牙齿进 入功能状态后，开始形成细胞性牙骨质。 4．牙根发育的基因调控 牙根发育过程中，基因调控无疑起着不可缺少的作用，目前有关基因的调控尚不 十分明确。现阶段研究表明HERS表达Msx2、TGFp1、3，LEF-1，EGF，EGFR、IGF—II、 胰岛素生长因子I受体等，而根尖部间充质表达BMP2、4． 我们对牙根发育的基因调控研究是从病例入手的，证实了碱性磷酸酯酶基因 (ALPL)和外胚叶发育不全基因(EDA)为牙根发育不良的可疑致病相关基因；进行突 变检测发现了3种突变类型；建立差异表达基因文库，筛选出15个差异表达基因片段， 挑选了MCPRl和ADAM28进行研究；发现MCPRl基因可作为核转录因子或核孔蛋白在牙 根发育中发挥调控作用。从原核、真核表达系统及反义核酸水平综合论证了ADAM28参 与牙胚的发育过程，并在牙源性上皮细胞和间充质细胞的增殖、分化、凋亡以及基质 的矿化中起着重要的调控作用。 采用改良消减杂交建立了大鼠牙根发育差异表达基因文库，经反向点杂交筛选消 减文库的克隆，测序及同源性分析，筛选到与牙根发育相关的Nfic、SellL等20余个基 因片段、基因的选择性剪接体和一个新基因片段Mrpl。证实SellL基因通过抑制Notch 信号，促进TGFD信号、抑制牙胚细胞的增殖、促进牙胚细胞的凋亡和分化而影响牙根 发育模式的形成。 5．牙胚器官组织的体内种植和牙胚组织细胞的体外培养：