制备猪血小肽发酵条件优化地研究.pdfVIP

制备猪血小肽发酵条件优化的研究 方俊1，卢向阳墉，邱业先2，蒋红梅1，莫瑾1 2．仲凯农学院，广州 1．湖南农业大学生化与发酵工程实验室，湖南长沙410128： 本研究在探讨了发酵时间、温度、接种量、起始pH值，装料量等单因素对猪 RSREG 血发酵法制备小肽影响的基础上，通过二次回归旋转组合设计，利用SAS 程序进行响应面分析，探讨影响猪血小肽生成的各种因素及其相互作用，以期优 化猪血发酵制备功能性小肽的作用条件。 材料与方法 主要材料：、A32菌株本实验室筛选保存；新鲜猪血(屠宰后30min以内)。 彳 D 主要实验方法：水解度DH=半×100％ o A为猪血发酵后三氯乙酸(TCA)可溶氮：B为猪血发酵前三氯乙酸(TCA)可溶氮； C为猪血发酵前总氮含量 实验设计 Table1Factorsandleversofexperiment 2结果与讨论 2．1回归方程的建立与显著性分析 根据二次回归旋转组合试验设计，利用DPSV3．01版统计软件对实验结果 进行统计分析，以O．5为显著水平，可以得到相关回归系数，其回归方程为： 32+0．41250X1X2．0．13750X1X3+O．58750X2X3 并进一步对回归方程进行分析，其系数显著性结果： xl 血发酵水解度的影响不显著(pO．5)。以下是Q=0．50显著水平剔除不显著项后， 简化后的回归方程： X32+0．41250X1X2+O．58750X2X3 2．2显著交互作用对发酵猪血蛋白水解度的影响 129 对猪血蛋白降解为小肽最为有利，其理论预测值／)／7为37．5％。 从图2中可以看出，当接种量在2．82％一4．48％，发酵时间为54．oo一 67．17h时对猪血蛋白降解为小肽最为有利，其理论预测／9／-／为37．69％。 “．T--I．N．HI‘=2：2：：#．譬一“。 时对猪血蛋白降解为小肽最为有利，其理论预测值191-I为37．53％。 2．3利用回归方程对发酵条件的优化 of12 whosePH Table list 2requency projects ab～ove—兰鱼二_塑 interval error 95％的distribute Plus Standard equal xl ．0．333 0．180 ．0．686…0。020 x2 ．0．333 0．136 ．0．600…．O．067 分析结果表明，最高值的各个因素组合为接种量4％，培养温度31℃，发 酵时间60h，理论预测删为37．97％，由表2可知该组合实验值为37．956％， 说明通过响应面分析建立的模型能够较精确对本实验中A32发酵猪血进行预报， 通过响应面分析来优化发酵条件是可信的。 3结论 环境因子对A32发酵猪血有着显著影响，通过响应曲面法进行试验设计， 130 可以充分观察不同因子间相互作用对发酵过程的影响并优化发酵工艺，这有利 于提高猪血小肽的产量，缩短生产周期，实现发酵过程的数字化控制，同时响 3。 应面分析也为微生物预报