银杏内生链霉菌HG2393菌株发酵后地提取物对小菜蛾地生物活性研究.pdfVIP

610 植物保护与现代农业 银杏内生链霉菌HG2393菌株发酵后的 提取物对小菜蛾的生物活性研究+ 徐红星 吕仲贤 俞晓平 陈建明 郑许松 陈列忠 张珏锋 (浙江省农业科学院 植物保护与微生物研究所，杭州310021) 摘要：HG2393茵丝体丙酮提取物对小菜蛾幼虫的生物活性略高于乙醇提取物，其校正 死亡率分男q为45．40％和42．22％。但两者无显著差异。而对4龄幼虫的活性显著低于2龄幼 虫，校正死亡率分别为16．73％和25．06％，两种提取物之间仍无显著差异。HG2393茵丝体 乙醇粗提物对小菜蛾的作用方式包括拒食活性、生长发育抑制作用和毒杀作用等。在选择性 和非选择性条件下，其提取物对小菜蛾幼虫的拒食中浓度(AFC，。)分别为4824mg／L和 25 479mg／L 813mg／L，同时随着小菜蛾幼虫龄期的增加拒食作用降低，其拒食中浓度分别为15 和26 379mg／L。取食经处理叶片的小菜蛾幼虫的体重增加明显低于对照组，且处理后的幼虫 化蛹率和羽化率显著降低。 关键词：银杏；内生链霉菌；生物活性 小菜蛾Plutella L是世界性十字花科蔬菜重要害虫之一，由于其繁殖速度快 xylostella 和世代重叠严重等特性，极易产生抗药性。已有研究证明它不仅对有机磷、有机氯、氨基 甲酸酯和拟除虫菊类杀虫剂等化学杀虫剂产生了抗药性…，而且对印楝素、苦皮藤素等 植物杀虫剂以及常用的Bt制剂、阿维菌素及多杀菌素等微生物源杀虫剂也产生了抗药 性心刮。研制新的杀虫剂，制定合理的治理措施，延缓其抗性的产生，已成为生产和科研 人员关注的热点。 ’ 从天然产物中寻找新的杀虫活性物质是开发新杀虫剂和克服或延缓害虫抗药性产生的 有效途径之一[7】。杀虫抗生素属农用抗生素范畴，是微生物的次级代谢产物。与化学农 药相比，具有对人畜安全、高选择性、在自然环境中易于降解等特点而受到了人们的重视 并进行了广泛的研究。本文研究了银杏内生链霉菌HG2393菌株发酵后的胞内物质对小菜 蛾的生物活性，旨在明确其对小菜蛾的作用方式及为今后用于防治小菜蛾提供依据。 1材料与方法 1．1 材料 HG2393菌株乙醇提取物：将发酵后得到的菌丝体经超声波破碎后，用85％乙醇浸泡 3次，合并浸泡液，过滤后用旋转蒸发仪浓缩至精膏。然后用85％乙醇溶解后配置成高浓 度溶液。 ·基金项目：浙江省科技厅项目(2004c32005)；浙江省自然科学基金(Y304193) @gmail．coin 研究论文 611 小菜蛾：自浙江省农科院试验场未施农药的甘蓝上采集小菜蛾蛹，置于(25±2)℃， 补充营养。以盆栽甘蓝供其产卵。孵化后的幼虫用甘蓝叶饲养。在室内续代繁育8～10 代，收集卵龄一致的卵，孵化后饲养到2龄或4龄供试。 1．2方法 1．2．1 不同溶剂提取液对小菜蛾的毒杀作用 于300ml三角瓶中装入60ml的液体培养基，每瓶接一接种环经活化的孢子。28℃、 180rpm摇床培养，3d后将各发酵液转移到离心管中，5 波破碎后分别用lOml85％乙醇和丙酮浸泡，并提取24h，过滤后乙醇提取液、丙酮提取 液。将直径为6em的新鲜甘蓝叶碟，在各溶剂提取液中浸渍2s，自然挥发干后放入直径 虫10头，用刺有针孑L的保鲜膜封住，分别用丙酮和乙醇处理的叶碟作对照。各10次重 复。48h后检查幼虫存活情况。 1．2．2 乙醇提取物对小菜蛾幼虫的拒食作用 5％、 (1)选择性取食：将乙醇提取物浸膏用85％乙醇配制成浓度分别为0．062 置好的溶液中浸渍2s，用乙醇处理的叶碟作对照。自然挥发干后，将处理叶碟和对照叶 碟各2片呈十字形交叉排列放置于直径为9era、衬于有湿滤纸培养皿中。在直径为lem的 滤纸片上接已饥饿30min的小菜蛾幼虫10头，放在培养皿中间，