藤梨根正丁醇提取物对人食管癌细胞生长作用的实验研究_药学论文.docVIP

藤梨根正丁醇提取物对人食管癌细胞生长作用的实验研究_药学论文 藤梨根正丁醇提取物对人食管癌细胞生长作用的实验研究_药学论文 作者：张丽， 国宏莉， 田林， 曹书芬， 度长海 [摘要] 目的:探讨藤梨根正丁醇提取物对培养的人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用。方法:MTT比色法检测藤梨根正丁醇提取物在不同浓度(1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml)及不同时间(24 h、48 h、72 h)对Eca-109细胞生长抑制作用， TUNEL法检测其对癌细胞生长的诱导凋亡效应。结果:①藤梨根正丁醇提取物对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强。②提取物对瘤细胞有明显的凋亡效应。结论:藤梨根正丁醇提取物能有效抑制人食管癌Eca-109细胞生长。 　　[关键词] 藤梨根/猕猴桃根；食管肿瘤；抑制；凋亡 　　Abstract:Objective To evaluate the inhibitory effect of extracts from Actinidia arguta by n-butyl alcohol on human carcinoma of esophagus cells(Eca-109).Methods MTT colormetric assay was used to examine the growth inhibition of extracts from Actinidia arguta by n-butyl alcohol on Eca-109 cells, TUNEL test was performed to observe the apoptosis induced by the extracts (1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml)on Eca-109 cells. Results ① The inhibitory effect of the extracts on Eca-109 cells was increased in a dose-and time-dependent manner. ②The extracts could significantly induce apoptosis of Eca-109 cells. Conclusion The extracts from Actinidia arguta by n-butyl alcohol could effectively inhibit Eca-109 cell growth. 　　Key words: Tengligen/actinidia arguta; Esophagus tumor; Inhibitory effect; Apoptosis 　　细胞凋亡是由基因编码控制的一种细胞的程序性死亡，是机体维持正常生理活动所必需的。近年发现细胞凋亡在许多疾病尤其在肿瘤的发生、发展及转归中起着重要作用，这为肿瘤病人的治疗提供了新的思路。随着中医药对肿瘤治疗的大量临床观察及实验研究的深入,人们逐渐肯定了它对肿瘤治疗方面的疗效。其抗肿瘤作用机制有多方面，如抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，抑制蛋白酪氨酸激酶（protein tyrosine kinase,PTK）活性等[1-4]。藤梨根又称阳桃根，为植物猕猴桃科藤梨（软枣猕猴桃）Actinidia arg-uta(Sieb.teZucc.)Planch.或猕猴桃A.chinensis Planch.的根。研究表明，藤梨根对多种肿瘤细胞有生长抑制作用，采用不同方法所得的提取物其抑制作用存在一定的差异[5-6]。本文通过观察藤梨根对培养的人食管癌Eca-109细胞生长的作用，以探讨藤梨根对人食管癌细胞的作用机制。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料人食管癌细胞Eca-109细胞株购于上海市中科院细胞库，RPMI-1640培养基购于武汉天源生物技术有限公司，为Gibco公司产品(货号31800-022)；超级新生牛血清为杭州四季青生物工程有限公司产品(批号050126)；实验用1∶250胰酶购于武汉天源生物技术有限公司，为Difco公司产品(批号020411)；四甲基偶氢唑蓝(MTT) 购于武汉天源生物技术有限公司，为Duchefa分装(货号BS0880)；二甲亚砜(DMSO) 购于武汉天源生物技术有限公司，为Sigma公司产品。TUNEL试剂盒(编号ZK-8005) 购于北京中杉生物技术有限公司。 　　1.2 细胞培养细胞在含10%小牛血清的RPMI 1640培养液中，37 ℃、5%CO2条件下培养，24 h换液一次。 　　1.3 药物制备将藤梨根1 kg粉碎成粗粉，烘干备用。取藤梨根500 g，加入3 000