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生物玻片标本的制作技巧 许星鸿 浦寅芳 (淮海工学院海洋学院，江苏连云港222005) 摘要：在生物实验教学中常用的生物玻片标本制作方 3．装片的制作 法有涂片法、装片法、切片法等。本文对常用的生物玻片标本 3．1在观察动物组织细胞的临时装片时．为保持细胞的正 的制作技巧进行了总结。vT．提高生物实验教学水平。 常形态，应根据动物种类的不同使用相应的牛理盐水。如哺乳 关键词：生物实验教学生物玻片标本制作技巧 类等温血动物用0．9％生理盐水，两栖类等冷血动物用0．65— 0．7％生理盐水，无脊椎动物用0．45％生理盐水。海产无脊椎动 在生物实验教学和课外科技活动中，经常需要制作生物 物可用过滤海水。 玻片标本。笔者在长期的工作实践中积累了一定的经验，现把 3．2染色可使观察更清楚，除了碘液(碘0．59、碘化钾19、水 生物玻片标本的制作技巧总结如下： 1．玻片的清洗 酸lml)染色。 玻片的清洁将直接影响到制片质量，所以制作玻片标本 3．3制作半永久装片，可用甘油封片。将固定、染色过的标 的第一步是要对载玻片和盖玻片进行清洁处理。 本放入5％甘油中，用纱布封121，放在阴凉处2—3天，使水分蒸 1．1新购买的玻片不能直接使用．要先浸泡于95％酒精中。 发、甘油变浓后，吸一滴带有标本的甘油于载玻片上．盖上盖 以去除表面的附着物质，临用前取出，晾干或烘干备用。 玻片。对于怕压、易碎的标本，可在甘油的两边放两根细玻璃 1．2使用过的旧玻片，先用肥皂水或洗农粉水煮沸O．5h，冷丝，再加盖玻片。 却后用软毛刷刷掉脏物，用流水冲洗干净后，置于95％酒精中 3．4制作永久装片，一般用树胶封片。封片前。要先将固 备用。如果是石蜡切片可先放于二甲苯(可用制片时【旦l收的废 定、染色过的标本经各级酒精及两次纯酒精脱水、每级15min。 弃二甲苯。既避免污染环境又节省实验成本)中浸泡数小时， 然后用酒精二甲苯等混液、两次纯二甲苯透明各15min。处理 把封片用的树胶溶解掉．将盖玻片和载玻片分开后，再用肥皂 小型的浮游生物，在换液时可离心，使其沉淀，便于操作。 水煮沸。对于很脏的IH玻片可先用洗液浸泡24h(洗液配制：取 4．切片的制作 重铬酸钾509，加水300Tnl，加热搅拌溶解，待其冷却后，徐徐注 4．1徒手切片 入浓硫酸250ml。边加边搅拌即成，可长期使用)，取出用自来 在常规的徒手切片制作中。效果不好控制．且易切伤手 水冲洗干净后，置于95％酒精中备用。 指。可将废弃的唇膏盒废物利用，清洗干净后。切削合适的萝 2．涂片的制作 卜、土豆等作为央持物插入盒内，旋转盒底．夹持物及材料可 2．1取材要快速。避免发生细胞自溶现象；操作要轻巧，防 随意升降，用刀片沿管口平切，即可获理想切片。 止损伤细胞结构。 4．2石蜡切片 2．2涂片要均匀。厚薄要适度，太厚细胞堆叠，太薄细胞过 少，都会影响观察。操作时，以在载玻片上涂上淡淡的一层样 品为宜。如果样品细胞密度过大。如精液过浓可用生理盐水稀 保存，可在70％酒精中加入10％甘油，以避免标本发脆。 释后再做涂片。 4．2．2在脱水换液时，可用吸水纸将标本表面水分轻轻蘸 2．3制作血涂片时，须用双蒸水。否则易引起染料沉淀；Giem．掉。再投入到下一级高浓度酒精中，这样可提高脱水效果。 sa染液对酸碱度极敏感，当染液偏酸时，红细胞染成红色，偏碱时 4．2．3透明时如果室温较低。可适当延长时问或置于温箱 则染成蓝色，所以最好用pH6．8_1．0的缓冲液来配制染液。 中加热。 巧的讲解，并帮助学生掌握这些方法和技巧。建立物理模型是