植物多糖提取液的几种脱蛋白方法的比较分析.pdfVIP

维普资讯 2004年8月 重 庆 大 学 学报 Aug．2004 第27卷第8期 JournalofChongqingUniversity VoI．27 No．8 文章编号：1000—582X(2004)08—0057—03 植物多糖提取液的几种脱蛋白方法的比较分析 李 知敏，王伯 初，周 菁，彭 亮 (重庆大学 生物工程学院 生物力学与组织工程教育部重点实验室，重庆 400030) 摘 要：多糖对肿瘤、病毒、心血管等方面具有独特的生物活性，且细胞毒性很低，因此多糖的分离 及纯化一直是一个很有意义的研究课题。实验 以多糖损失率和脱蛋 白率(r)为衡量指标，通过对几种 脱蛋白方法的比较，优化出植物多糖提取液的脱蛋白方法，为多糖的纯化提供了一定的参考。选用了3 种较为常见的方法：三氯乙酸法、盐酸法及沙维积法(Sevag法)对植物多糖提取液进行脱蛋白处理。三 氯乙酸法、盐酸法及 Sevag法的脱蛋 白率分别为46．1％、72．5％和42．3％，多糖损失率分别为6．1％、 l5．1％和 14．3％。盐酸法脱蛋 白率高，但它的多糖损失率较高；三氯乙酸法较温和，但除蛋 白效率不 高；Sevag法的脱蛋白效果不及前两种方法。 关键词 ：多糖；提取液；脱蛋白；比较 中图分类号 ：Q一33l 文献标识码：A 糖类又称为碳水化合物，是植物光合作用的初生 以脱蛋白率及多糖损失率为指标，通过实验 比较，优化 产物，是一类最丰富的天然产物，除了作为植物的贮藏 出多糖提取液的脱蛋白方法。 养料和骨架之外，还通过它们进行合成了植物中的绝 大部分成分…。多糖在植物体内广泛存在，并且含量 1 实验材料 较高 J。2O世纪5O年代末对真菌多糖的抗癌效果的 某种天然植物(重庆生长)；葡萄糖 (重庆北碚化 发现使人们开始了多糖系列的化学研究。日本从 2O 学试剂厂生产)；牛血清白蛋 白(中国医药上海化学试 世纪6O年代开始研究担子菌多糖的药物活性，并开发 剂公司生产)；考马斯亮兰 G一250(中国医药上海化 了一些有名的药物；中国对多糖的研究始于2O世纪 学试剂公司生产)；浓硫酸 (重庆无机化学试剂厂生 70年代，且发展很快。到 目前为止，人们发现多糖对 产)；苯酚(重庆北碚化学试剂厂生产) 肿瘤、病毒、心血管、抗衰老等方面有独特的生物活 性 ，并且已有300多种多糖类化合物从天然产物 2 方法与结果 中被提取出来 ，其中从中药中获得的水溶性多糖最为 2．1 标准曲线的制备 重要l3J。由于多糖多种多样的生物活性功能以及在 2．1．1 糖标准曲线的制备 -18】 功能食品和临床上广泛使用，使多糖生物资源的开发 称取干燥至恒重的无水葡萄糖 10mg，置 100mL 利用和研究 日益活跃，成为天然药物、生物化学、生命 容量瓶中，加水溶解后稀释至刻度制成贮备液，分别吸 科学的研究热点。 取贮备液0．3，0．4，0．5，0．6，0．7，0．8，0．9，1．0mL，加 在多糖提取液中，蛋白质却 占了很大的比例。因 此，如何尽量多的去除蛋白质而保留多糖的有效成分 水稀释至2mL，向各管中加入5％苯酚试剂 lmL，混 成为了一个很有意义的研究课题。但就 目前笔者所查 匀。沿管壁加入浓硫酸5mL，静置5min，振摇，置沸 的资料中，研究脱蛋白方法及比较各种脱蛋白方法的