9生物技术实践.pptVIP

本专题是实验内容，主要包括微生物的利用、酶的应用和生物技术在食品加工及其他方面的应用等。从近年的高考情况看，高考命题时往往从实验细节入手，比较注重对实验基本操作方法的考查。 预期在今后的知识考查中，命题热点有：以发酵食品加工为背景考查微生物的分离、纯化和培养过程以及在食品加工中所起的作用；结合食品制造和洗涤业考查酶的固定化及实际应用；将植物组织培养的有关知识和植物激素的应用及植物有效成分的提取相联系，进行综合考查；以环境污染(如某种有害物质的存在及量的多少)为背景考查微生物的生存条件和培养以及生物技术在其他方面的应用。 复习时，要注意以下几个方面：(1)从实验的角度剖析每项技术，把握其原理、材料与器材、操作流程、注意事项等；(2)用对比的方法区分一些重要概念和方法，如果酒和果醋制作的比较，水蒸气蒸馏法、压榨法、有机溶剂萃取法的比较，平板划线操作与涂布平板操作的比较等；(3)用联系的观点看待不同的技术，如酵母菌可涉及果酒的制作、微生物的分离与培养、固定化酵母细胞等内容。 一、果酒、果醋、腐乳及泡菜的制作原理及过程 二、微生物培养中几种实验操作的注意事项 1．倒平板 (1)培养基灭菌后，需冷却至50℃左右。 (2)左手拿培养皿，右手拿锥形瓶，左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不要完全打开。 (3)整个操作在酒精灯火焰旁进行，避免杂菌污染。 (4)平板冷凝后要倒置的原因：防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基，造成污染。 (5)倒平板时，如果培养基溅在皿盖和皿底之间的部位，这个平板应丢弃。 2．平板划线 (1)第一次划线及每次划线之前都需灼烧灭菌，划线操作结束仍需灼烧接种环，每次灼烧目的如下表： (2)灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。 (4)画线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破。 3．稀释涂布平板 (1)稀释操作时：每支试管及其中9 mL水、移液管均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm处。 (2)涂布平板时： ①将涂布器末端浸在盛有体积分数为70%的酒精的烧杯中。取出时，多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃。 ②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。 ③酒精灯与培养皿距离要合适，移液管头不要接触任何物体。 (2)b为再分化，是愈伤组织分化成根或芽等器官的过程。 在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生分化，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官，通过脱分化形成愈伤组织并由愈伤组织再分化形成植物体。 特别提醒 菊花茎的组织培养与月季花药培养的比较 ①菊花茎的外植体细胞是体细胞，它的全能性小于月季花药培养中的外植体细胞(生殖细胞)。 ②菊花的组织培养中每日要求用日光灯照射12 h，而花药培养中最初不需要照光，幼小植株形成后才需要照光。 ③花粉植物属于单倍体植株，需要用秋水仙素处理后，才能获得正常可育的个体。 四、酶的研究与应用 1．关于酶的探究实验 (1)实验设计时要遵循单一变量和对照两大原则，严格控制无关变量。 (2)探究不同温度(或pH)对酶活性的影响时，温度(或pH)作为自变量，通常通过设置合理的梯度来确定最适值。最适值是通过比较相同时间内获得的产量或效果来确定的。 2．直接使用酶、固定化酶固定化细胞的比较 五、DNA的粗提取与鉴定 六、PCR技术 1．PCR一般要经历三十多次循环，每次循环都包括变性，复性、延伸三步。 2．两个引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。 七、血红蛋白的提取和分离 1．方法及原理 2.基本步骤 样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定 (2)血红蛋白释放过程中，蒸馏水的作用是涨破红细胞，甲苯作用主要是溶解细胞膜。 (3)为了加快干凝胶的膨胀，可将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，通常只需1～2h，还可除去凝胶中可能带有的微生物，排除胶粒内的空气。 (4)在色谱柱中填凝胶的时候要尽量紧密，以降低凝胶颗粒之间的空隙。在装填凝胶柱时，不得有气泡存在，因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。在凝胶色谱操作过程中，不能发生洗脱液流干，露出凝胶颗粒的现象。一旦发生上述两种情况，凝胶色谱柱需要重新装填。 (5)滴加样品时，吸管管口贴着管壁环绕移动加样，不要破坏凝胶面。 (6)根据红色区带的移动状况判断收集流出液时间。 八、植物有效成分的提取 1．植物芳香油的提取方法的比较 2.胡萝卜素的提取与鉴定 (1)流程 胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素 (2)关于纸层析法 ①点样应该快速细致，每次点样后，要等滤纸干燥后再进行点样，可用吹风机将溶剂吹干，注意保持滤纸干燥；点样时就注意点样斑点不能太大，如果用吹风机吹干，温