奥美沙坦通过延髓腹外侧区AT1受体减弱自发高血压大鼠血管紧张素Ⅱ引发的中枢性升压反应_临床医学论文.docVIP

奥美沙坦通过延髓腹外侧区AT1受体减弱自发高血压大鼠血管紧张素Ⅱ引发的中枢性升压反应_临床医学论文 奥美沙坦通过延髓腹外侧区AT1受体减弱自发高血压大鼠血管紧张素Ⅱ引发的中枢性升压反应_临床医学论文 作者：张占帅 林英子 任冬月 朱杰 【摘要】 目的 探讨奥美沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)外源性血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)引发的中枢性升压反应的影响以及与延髓腹外侧头端区(RVLM)血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)的关系。方法 实验大鼠分为SHR对照组(n=20，正常饮水)、奥美沙坦组(n=20，给予奥美沙坦30 mg·kg-1·d-1)和WKY组(n=20，WKY大鼠，正常饮水)。4 w后，三组大鼠腹腔麻醉，开颅定位RVLM后，股动静脉插管，观察注射AngⅡ前后血压和心率。采用逆转录聚合酶链反应(RT和免疫印迹方法检测各组RVLM内AT1受体mRNA和蛋白的水平，并进行光密度测定。结果 饲养中奥美沙坦组鼠尾血压能够达标。RVLM微量注射AngⅡ后三组大鼠的平均动脉压(MAP)不同程度升高，奥美沙坦组MAP升高幅度明显低于SHR组〔(26.3±0.75)vs(47.2±1.41)mmHg，0.01〕，但仍高于WKY组〔(21.5±0.72)mmHg，0.05〕。三组大鼠心率(HR)均有所升高，但差异无统计学意义。奥美沙坦组RVLM内AT1受体mRNA平均光密度明显低于SHR组〔(0.94±0.41) vs (2.41±0.37)，0.01〕，但高于WKY组(0.81±0.22，0.05)。奥美沙坦组RVLM内AT1受体蛋白平均光密度明显低于SHR组〔(0.51±0.09) vs (0.93±0.07)，0.01)〕，但高于WKY组(0.43±0.03，0.05)。结论 长期口服奥美沙坦能够通过降低RVLM组织中AT1受体水平，显著减弱SHR RVLM区微量注射AngⅡ引起的升压反应。 【关键词】 延髓腹外侧头端;自发性高血压大鼠;血管紧张素Ⅱ1 型受体;奥美沙坦 延髓腹外侧头端区(RVLM区)是交感输出和血压调节的重要脑区，接受延髓以上心血管中枢和外周传入的多种心血管活动信息，起到维持交感紧张性和稳定血压的作用。RVLM区存在多种神经递质及其相应受体，其中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其AT1受体在该区含量丰富〔1〕。AT1受体与AngⅡ结合兴奋该区血管运动神经元引起交感活动增加，血压升高。 因此，AT1受体在RVLM区血压调节中起到关键作用。近几年研究发现高血压动物模型和高血压患者的RVLM区AT1受体密度显著增加，神经元自发活动也增加〔2〕。猜测RVLM区高度表达的AT1受体在高血压的形成和维持中起到重要作用〔3，4〕。又有研究报道，自发性高血压大鼠(SHR)的RVLM区微量注入AT1受体拮抗剂氯沙坦能够减弱静注苯肾上腺素引起的升压反应〔5，6〕，表明氯沙坦可能通过阻断RVLM区AT1受体降低血压。本课题组曾研究发现奥美沙坦能够有效减弱RVLM区微量注射谷氨酸引起的升压反应。因此，设想长期口服奥美沙坦能够通过抑制脑干心血管中枢AT1受体表达，减弱RVLM区注射AngⅡ引发的升压反应。 　　1 材料与方法 　　1.1 药品和仪器 奥美沙坦(日本Sankyo公司)，AngⅡ(美国Sigma公司)，多道生理记录仪(日本Nihonkohden公司)，立体定位仪(日本Narishige公司)，微操纵仪、微量注射仪(日本Narishige公司)，微电极放大器示波仪(日本National公司)。 　　1.2 动物 SHR 40只，WKY大鼠20只(均雄性，10～12 w龄，北京维通利华动物中心)。SHR随机分成对照组和奥美沙坦组。奥美沙坦组大鼠饮用水中加有奥美沙坦(30 mg·kg-1·d-1)。对照组和WKY组大鼠正常饮水。各组大鼠均喂养4 w，每周测2次鼠尾动脉压。 　　1.3 一般手术处理 随机取SHR、奥美沙坦、WKY组大鼠各10只，乌拉坦(1.5 g/kg)腹腔麻醉。行气管插管和股动脉、股静脉插管，动脉导管连接记录平均动脉压(MAP)及心率(HR)。静脉补充20 %氨基甲酸乙酯(1 g/kg)维持麻醉。大鼠取俯卧位，头部固定于脑立体定位仪上，沿中线切开颅顶至背正中皮肤，去除部分颅骨、硬脑膜及小脑，充分暴露延髓背面。通过电热毯使肛温维持在37℃左右。 　　1.4 RVLM定位和给药 充分暴露延髓后，根据Paxinos和Watson鼠脑解剖图谱定位RVLM(以延髓闩部为参考点，RVLM在头端1.5～1.8 mm，中线旁开1.6～2.0 mm，延髓背侧表面下3.0～3.4 mm处)。将3根外径25～35 μm的注射微电极安装在注射用的微操纵仪上，尖端放置到RVLM区，经微量注射仪分别向三组大鼠单侧RVLM微量注射AngⅡ(100 pmol/