天然茯苓和液体发酵茯苓质量标准的研究_临床医学论文.docVIP

天然茯苓和液体发酵茯苓质量标准的研究_临床医学论文 天然茯苓和液体发酵茯苓质量标准的研究_临床医学论文 作者：李羿, 万德光, 钟世红, 李晨 【摘要】 液体发酵茯苓为采用现代发酵工程技术生产的一种新型发酵中药。2005年版中国药典茯苓的质量标准尚不完善。笔者在粉末显微特征、三萜类化合物、多糖、灰分和氨基酸含量等方面,对液体发酵茯苓和天然茯苓展开研究,建立其质量标准,为其质量控制打下基础。 【关键词】 天然茯苓; 液体发酵茯苓; 质量标准 　　【Abstract】 The liquid fermented Poria cocos is a new type of fermented traditional Chinese medicine produced by modern fermentation technology.The standard of Poria cocos is not perfect in Chinese Pharmacopeia(2005).We studied the microscopic characteristics,terpenoids,polysaccharides,ash and amino acids content of natural Poria cocos and liquid fermented Poria cocos.Thus,the standards of natural Poria cocos and liquid fermented Poria cocos were established,which provided a basis for its quality control. 　　【Key words】 natural Poria cocos;liquid fermented Poria cocos;quality standard 　　茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.) Wolf的干燥菌核,为利水渗湿要药[1]。茯苓可通过野生采集、人工栽培和发酵培养三个途径获得。除野生采集获得天然茯苓外,可采用传统的茯苓栽培法(固体发酵)来生产天然茯苓[2],或采用现代发酵工程技术来生产液体发酵茯苓[3]。天然茯苓和液体发酵茯苓由于发酵培养基和发酵方式不同,导致天然茯苓和液体发酵茯苓(发酵中药茯苓)的代谢途径和代谢产物有所差异。因此,液体发酵茯苓为一种新型发酵中药[46]。2005年版中国药典仅在检查项目中对茯苓水分、总灰分和酸不溶性灰分有定量要求,而对茯苓主要活性成分多糖、三萜类化合物都未有明确要求[7]，对液体发酵茯苓质量标准的制定工作尚未开展，缺乏完善的天然茯苓和液体发酵茯苓质量标准,严重地影响了茯苓质量的有效控制和资源的开发利用。因此,笔者在对天然茯苓和液体发酵茯苓研究的基础上,制定了天然茯苓和液体发酵茯苓的质量标准,为茯苓相关保健食品和药品的开发打下基础。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　天然茯苓为购于成都杏林大药房的茯苓丁。液体发酵茯苓为经发酵罐补料液体发酵5 d的发酵液离心干燥后所得[8]。 　　酵母浸膏、蛋白胨为Oxoid产品;苯酚(须重蒸);薄层层析硅胶GF254(青岛海洋化工有限公司);葡萄糖、K2HPO4、MgSO4.7H2O、盐酸、氯仿、丁醇、乙醇、丙酮、乙醚和NaOH等试剂均采用国产分析纯。 　　全温振荡器(哈尔滨东联电子技术开发有限公司);NBS Bioflo Ⅲ 型发酵罐;Beckman J2型离心机;Sartorius BP121S 型电子天平;Leica DM 1000 型显微镜;Lambda 35 UV/VIS Spectrometer紫外分光光度仪;ZF型暗箱式紫外透射仪(上海顾村电光仪器厂);氨基酸自动分析仪;灰分测定装置;FW 177 型粉碎机。 　　1.2 茯苓粉末的制备 　　将烘干的液体发酵茯苓和天然茯苓分别放入粉碎器中粉碎,过筛(筛子孔径为0.17～0.25 μm),烘箱中60 ℃烘干至恒重,装入有塞瓶中,贴上标签,放入干燥器内备用。 　　1.3 茯苓粉末的显微鉴定 　　1.3.1 茯苓粉末的临时水装片 洗净擦干载玻片及盖玻片。用玻璃吸管加1滴蒸馏水于载玻片中央,用镊子取少许制备的液体发酵茯苓和天然茯苓粉末于蒸馏水中,用解剖针搅匀,再盖上盖玻片,注意不要产生气泡，多余液体用小滤纸条吸干。 　　1.3.2 茯苓粉末的临时水合氯醛装片 洗净擦干载玻片及盖玻片。用玻璃吸管加1滴水合氯醛溶液于载玻片中央,用镊子取少许制备的液体发酵茯苓和天然茯苓粉末于液滴中,用解剖针搅匀,接着手持载玻片的一端于酒精灯上均匀加热(注意加热时不要使液体沸腾,以免产生大量的气泡),然后离开酒精灯,加1滴稀甘油充分混匀