天冰调督胶囊对点燃法致癫痫大鼠记忆行为学改变的影响_临床医学论文.docVIP

天冰调督胶囊对点燃法致癫痫大鼠记忆行为学改变的影响_临床医学论文 天冰调督胶囊对点燃法致癫痫大鼠记忆行为学改变的影响_临床医学论文 作者：裴林 刘春燕 裴逸然 贾晓明 白文忠 马学伟 【摘要】 目的 观察天冰调督胶囊对印防己毒化学点燃法致癫痫大鼠学习记忆行为学改变的影响。方法 用印防己毒点燃法建立癫痫大鼠模型，观察天冰调督胶囊的疗效，并以丙戊酸钠、拉莫三嗪作为对照观察。分别用大鼠Morris水迷宫、交替电刺激Y迷宫评价大鼠学习与记忆。结果 天冰调督胶囊可明显改善癫痫模型大鼠水迷宫、交替电刺激Y迷宫空间学习记忆指标，迷宫错误次数明显少于模型组，中药高量组并与拉莫三嗪组无显著差异；中药各组寻找平台时间明显缩短，并与丙戊酸纳组比较有一定优势。结论 天冰调督胶囊可提高印防己毒化学点燃法致癫痫大鼠学习记忆行为，对促进患者康复具有积极意义。 【关键词】 天冰调督胶囊；癫痫大鼠；学习记忆；行为学 　　癫痫患者多伴有注意力分散、学习记忆功能减退等认知功能受损的表现，特别是在长期癫痫发作伴学习记忆障碍的中老年癫痫患者，生活质量受到严重影响，为国内外专家治疗关注的热点之一〔1，2〕。而现有常用抗癫痫药甚至对认知功能有一定损害作用。因此，抗癫痫的同时能改善认知功能的药物研究具有重要的临床指导意义。本文在临床应用天冰调督胶囊治疗癫痫认知障碍取得一定疗效的基础上，观察该方药对印防己毒素（PTX）化学点燃癫痫模型大鼠认知行为学的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物 　　雄性SD大鼠，100只，购自河北医科大学实验动物中心（合格证编号：DK0411），清洁级，起始体重110～130 g，于实验室专人适应性饲养1 w，实验前自由饮食，12 h光亮/黑暗条件、22℃～25℃环境温度，分隔喂养，饲养地点在中药药理学实验室（Ⅱ级）。 　　1.2 药物及试剂 　　天冰调督胶囊（调肝解毒方）主要成分为柴胡、桂枝、天麻、全蝎、人工牛黄、黄连、绞股蓝等，中药饮片由河北省中医药研究院饮片厂提供，河北省中医药研究院制剂室研制（冀药制字的浓缩浸膏，并严格按照经省药监局批准质量标准执行〔3〕。丙戊酸钠：湖南湘中制药有限公司（批号，规格：200 mg/片；拉莫三嗪：Glaxo Operations UKLimited生产(批号：ZJ0010)。各药存4℃冰箱供实验用，临用时分别配成不同浓度的悬浊液，灌胃时温服。PTX：美国Sigma公司，规格：1 g/瓶。临用时溶于生理盐水，配置成0.01%溶液，存4℃冰箱供实验用。 　　1.3 仪器 　　Morris水迷宫、交替电刺激Y迷宫：北京硕林苑科技有限公司，水迷宫水池的上方装有摄像系统，记录保存大鼠的运动轨迹。脑立体定位仪、生理机能信号采集与分析系统、脑电图仪等。 　　1.4 癫痫大鼠模型制备 　　按文献〔4，5〕方法，每天上午10:00至11:30腹腔注射PTX 1.5 mg/kg，连续注射20～30 d，达到完全点燃时停止造模。每次注射后观察大鼠30 min，注射20 d起以录像机观察24 h大鼠的动态变化，记录发作潜伏期、发作时症状表现与持续时间。点燃大鼠癫痫发作行为分级标准依据Racine〔6〕分级标准分为五级，凡获得连续３次4级或4级以上完全发作者，被认为完全点燃。 　　 　　1.5 点燃大鼠脑电图的确认 　　随机选取未造模正常组大鼠2只、完全点燃模型大鼠3只，进行发作间期脑电图描记。点燃癫痫大鼠出现阵发性痫性放电的高幅多棘综合波，持续1～2 s，表明造模成功。描记后大鼠不再加入后期实验中。 　　1.6 实验分组与治疗方法 　　剔除未达点燃标准或点燃过程中死亡及脑电图检测的大鼠，随机选取点燃成功大鼠75只，分为模型组、中药低量组、中药高量组、丙戊酸钠组和拉莫三嗪组，每组15只大鼠。正常组大鼠15只同期进行观察。 　　各组于造模第30 d开始连续灌胃观察，每100 g体重灌服1 ml，每日1次，共持续60 d。正常对照组、模型组灌服生理盐水（10 ml/kg体重）；中药低量组、中药高量组分别以混悬液（0.4、0.8 g/kg含生药量）灌胃；丙戊酸钠组（0.008 g/kg）、拉莫三嗪组（0.002 g/kg）混悬液灌胃给药。各组均以自来水为饮料，自由饮用，自由摄食。分别于模型成功后24 h和干预治疗60 d后进行相关指标测试。 　　1.7 交替电刺激Y迷宫试验 　　 　　①学习训练阶段将大鼠置于Y迷宫1臂，通电给予足部最小电刺激(初始刺激电压为20 V)，并以5 V为间隔单位上调刺激强度，直至大鼠有反应。电刺激5 s后同时拉起三臂的移动门，这时大鼠逃离1臂，如进入2臂给以相同强度的电刺激，通电持续到大鼠进入3臂，该臂中无电源刺激，臂端红灯亮。30 s后开始第2次尝试，改为以3