不同药物干预对骨髓干细胞移植治疗DLEVD 后促血管分化作用的研究水.pdfVIP

·139· jE塞主匡煎2Q螋生2月墓28鲞筮2期曼!红i磐IQ坠目B世煎T—radit—ional—ChineseMedicine,Februar一％2009．V01．28,No．2 不同药物干预对骨髓干细胞移植治疗DLEVD后 促血管分化作用的研究水 杨博华 鞠上 林东洋 刘凤桐 王刚 【摘要】目的探讨不同药物的干预对干细胞移植治疗糖尿病下肢血管病变(DLEVD)后促血管分化作用。方法78只 Lewis大鼠糖尿病缺血模型造模，分空白对照组、模型组、干细胞组、干细胞+中药组、干细胞+西药组、干细胞+中西药组。l周 后骨髓干细胞移植并予以不同药物于预4周。干预前后激光多普勒仪检测大鼠缺血后肢血流灌注，DSA大鼠后肢血管造影。 结果干细胞移植后，造模大鼠后肢血流量明显增加(PO．05)。有部分侧枝血管建立。结合药物干预后，缺血肢体血流比干 细胞移植显著增多(PO．05)。结论干细胞移植术后的药物干预是必要的，能有效促进血管新生，改善馅部循环，中西药物 的共同干预较好。 【关键词】药物干预；骨髓干细胞移植；糖尿病下肢血管病变；血管分化 糖尿病下肢血管病变(Diabetes Lower—extremity Vascular Disease，DLEVD)是糖尿病病人致残、致死 的主要原因。自体骨髓干细胞治疗DLEVD可以改酸一柠檬酸钠缓冲液(PH4．2) 善缺血肢体的血液循环。不失为一种有效的临床治 1．1．3仪器：OLYMPUSMIT一2型倒置相差显微镜 疗方法。为探讨中药对干细胞治疗DLEVD后的促 Artis 血管分化作用．我们应用大鼠模型对其进行了初步 门子AXIOMFA数字减影血管造影系统(德 的研究。现将结果总结如下。 国)、Heraeuscell型二氧化碳培养箱(德国)；北京半 1材料与方法 导体设备仪器厂胛1300型超净工作台(中国)； Calibur 1．1实验材料 IOFUGE一28RS型高速离心机(德国)；FACS Hos． 1．1．1动物及分组：Lewis大鼠78只。4周龄。体重流式细胞仪(美国)，强生ONETOUCH SureStep 200～2509(北京汇通利华，许可证编号：SCXK(京) 2003—0003)。其中3只为供髓鼠，10只为空白对照孔滤膜(上海医药工业研究院制)。 1．2实验方法 组，其余65只随机分为A组(模型组)、B组(干细胞 组)、C组(干细胞+中药组)、D组(干细胞+西药1．2．1骨髓单个核细胞悬液的制备：(1)骨髓单个核 组)、E组(干细胞+中西药组)各13只。 细胞的分离及培养：将3只供体Lewis大鼠用水合 氯醛腹腔注射麻醉致死，消毒．双侧后肢整肢截肢。 1．1．2药物与试剂：链脲佐菌素(STZ。德国 无菌条件下剪开股骨、胫骨骨髓腔。冲洗并收集骨髓 Boehringer—ingelheim生产)，黄芪注射液(成都地奥 九泓制药厂生产，批号：0512042)，血塞通粉针剂(三悬液。将骨髓悬液加在预置大鼠淋巴细胞分离液(密 七总皂苷，黑龙江珍宝岛制药有限公司生产．批号： 度为1．094)的10mL离心管液面上．密度梯度离心