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PMMA微流控芯片表面改性研究· 王辉刘欣戴忠鹏王利 白吉玲林炳承¨ 中国科学院大连化学物理研究所，大连，116023 微全分析系统(Micro．Total Analysis 念的提出，意味着分析仪器最终发展方向是微型化和集成化，包括样品前处理、富集、化学 反应、分离分析、检测等单元操作都可在芯片上集成化和自动化的完成，缩短了分析时间， 降低了样品消耗量。最初的微流控芯片绝大多数采用玻璃和石英为主要材料。但随着斗．TAS 技术和应用的不断发展，各种塑料材料逐渐引起了人们的重视，它的制作过程相对简单，费 用也比较低，可以一次性使用，因此有可能成为微流控芯片制作材料的理想替代品。各种制 作技术如激光消融，复制，注塑，和压模等已经用于塑料微流控芯片的制作中。大量商品化 的塑料原料通过不同的制作技术被加工成微流控芯片，目前使用最多的是PDMS和PMMA两 种塑料微流控芯片材料，但对塑料表面性质的研究还没有玻璃和石英透彻，因此塑料芯片在 使用过程中常会遇到电渗流控制，样品吸附等问题的困扰。本文以PMMA微流控芯片为研究 对象，通过紫外光聚合方法，对PMMA芯片通道表面进行了化学修饰，以达到控制电渗流和 抑制样品吸附的目的。 1．实验部分 1．1试剂和样品 荧光素钠(FITC)购自Aldrich公司。苯甲酮，丙烯酰胺，伴白蛋白，人血清白蛋白和胰 蛋白酶均购自Sigma公司。其他试剂均为国产分析纯。所有缓冲液均为二次水配制。 1．2PMMA微流控芯片 实验中所用芯片为本实验室自制的注塑型PMMA微流控芯片，具有十字交叉结构，分离通 ClTI。 道长4．8cm，进样通道长1．0cm，十字交叉处距离样品池，样品废液池，缓冲液池均为0．5 u ×75u u 微通道横截面近似为梯形，120m(上顶) m(下底)×30m(深)。刻有微通 mill的PMMA薄膜。每片芯片上并列分布着三条相 道的底板厚度为1。3姗，盖板是厚度为o．05 同的微通道。 1．3实验方法 首先将苯甲酮溶解于叔丁醇中，通过真空将苯甲酮溶液灌入PMMA芯片中，几分钟后，再 用水洗2分钟，然后灌入丙烯酰胺的水溶液，以高压汞(氙)灯(光谱物理公司，500W)为 Uv光源，对微通道内的聚合单体溶液曝光5分钟，然后用大量水冲洗，备用。 1．4电渗流的测定 电渗流的测定采用电流监测法，在芯片分离通道两端的储液池内分别加入等量的不同浓 度的电泳缓冲液(pH7．0，lOmIVl和6．7mM的磷酸缓冲液)。在分离通道两端串联一个电阻，加 压后，记录该串联电阻上电流变化所需时间，以此时间作为中性物质在通道内的迁移时间， 由此得出微通道内的电渗流大小和方向。 1．5微流控芯片电泳分离 “通讯联系人Email：belin@dicp．ac．cil nm，检测波 所有实验均在自制的激光诱导荧光芯片仪器上进行。激光的激发波长为480 长伴自蛋白经胰蛋白酶酶解后，用FITC进行标记，人血清白蛋白也用FITC进行 rnM 柱前标记。背景缓冲液为10 Borax，所有缓冲液在使用前均用0．22 gm微孔滤膜过滤。在 进样过程中，将样品池接地，施加300V电压于样品废液池，缓冲液池和废液池分别施加150 V电压，进样时间为20s。在分离过程中，将缓冲液池接地，在废液池上施加1000V电压， cm。 样品池和样品废液池分别施加250V电压。检测点距十字交叉处1．5 2．结果与讨论 2．1苯甲酮浓度的影响 改性对PMMA芯片通道内电渗流的影响如图l 所示。随着苯甲酮浓度的增加。PMMA芯片