鲐鱼消化道中蛋白酶的分离纯化与活性的研究.pdfVIP

鲨鱼肝混合脂肪酸的抑制肿瘤作用研究 祖文举1，李德山2．王喜文3 (1解放军第403医院，大连市116015；2大连市医药科学研究所；3天津市天河医院) 据文献介绍海洋中鲨鱼有250种，鲨鱼入药始见于《本革经集论》。用鲨鱼肝提取的鱼肝油用于补充儿 童发育期所需维生素A、维生素D，鱼肝油中除了儿童发育所需的维生素A、维生素D之外，含量最高的是角 鲨烯及多种脂肪酸。有文章介绍，角鲨烯与脂肪酸的混合物对某些肿瘤有抑制作用，本类将报告鲨鱼肝中混 合脂肪酸对某些肿瘤的抑制作用。 1材料与方法(略) 2结果 1．1对小鼠移植性肉瘤180($180)抑制试验 表1鱼肝油脂肪酸抑制s180效果 型量盘’蛭．： 塾塑墼』墨 堕重至!型g ： 塑塑主!塾—— 20 10 1-84．1-O84 43．6 1 0 10 2 11±066 ．342 0_5 10 231±0．75 280 蒸馏水对照组 10 3211o．91 2．2对小鼠移槽陛神经胶质瘤G422抑制试验 表2鱼肝油脂肪酸抑制G422效果 剂量／g·kg。1 动物数／只 瘤重x!s／g 抑瘤率／％ 2．o lO——一————i五五万————————面了—— l o 10 1 1．930．63 44．3 O5 10 2 10．78 33 326 蒸馏水对照组 10 3．46±098 3讨论 摄食不饱和脂肪酸多的人群，结肠癌，乳腺癌等肿瘤的发生率低于其他人群，很多的动物模型试验．饲喂 富含不饱和脂肪酸的膳食，肿瘤的发生率也低。用鲨鱼肝提取混合脂肪酸对动物移植肿瘤模型有一定的疗 效，尤其对小鼠神经胶质瘤G422的疗效显著。提示综合利用鲨鱼肝资源开发新药是十分有意义的。 鲐鱼消化道中蛋白酶的分离纯化及活性的研究 于国英，朱莉，韩志武 (青岛大学医学院附属医院，青岛 266003) 目前，国内对蛋白水解酶的研究和利用大部分是以家畜动物的脏器为主，而对鱼类特别是海洋鱼类蛋白 水解酶的研究报道尚不多，而国外在这方面却做了大量的工作。参考国外的资料，本课题从黄海之滨青岛加 工量较大的鲐鱼下脚料消化道中进行了蛋白酶的提取研究，并通过实验筛选出了提取蛋白酶的最适条件， 本文对鲐鱼消化道中提取的粗蛋白酶进行了分离纯化，并对此酶的活性及某些性质进行了研究。 1材料与方法 1．1材料(略) 1．2方法与结果 1．2．1鲐鱼消化道蛋白酶的分离纯化 去沉淀，上清液中加硫酸铵使饱和度达60％，离心，收集沉淀并溶于少量水中，4℃下用2％Naa溶液透析． 564 离心，除去透析后所产生的沉淀，将清液进行冷冻干燥。 1．2l 2 见图1 1、1 2，略)。将有酶活性的4个峰分别收集，进行冷冻干燥，将酶活性最高的峰5所收集到的蛋白 酶进一步纯化。 1．2．1．3SephadexG 75凝胶过滤取峰5所收集的蛋白酶干粉500mg上柱(1．5x 性，聚丙烯酰胺凝胶电泳呈一条带，将其收集并冷冻干燥。 1．3鲐鱼消化道蛋白酶活性及某些性质的研究 温度为50℃。 1．3．3pH对酶活力的影响，结果见图5(略)。该酶的最适pH在9左右。 1．3．4两价金属离子对酶活力