消渴肾宁汤对实验性糖尿病肾病大鼠内皮素水平影响地研究.pdfVIP

消渴病第口届学术研讨会论文集 消渴肾宁汤对实验性糖尿病肾病大鼠内皮素水平影响的研究 顾江萍。 粟德林。 (①大连市第二人民医院116011：②黑龙江中医药大学150040) 糖尿病肾病(DN)是糖尿病(DM)的一种严重的微血管病变之一，是糖尿病致残致 死的重要原因。针对目前治疗DN药物匮乏的状况，本研究通过消渴。肾宁汤对链脲佐菌素 所致的DN大鼠进行了血浆内皮素(ET-1)水平测定以及免疫组化检测，以探讨DN的发 病机制及药物作用机理。 材料和方法 实验动物中心提供。 2实验分组及造模方法：70只大鼠随机抽取20只，分成空白对照组和中药预防组， 每组10只。中药预防组大鼠先行中药灌胃～周，然后与其余50只大鼠～起参照文献方 法造模，50、只大鼠共成模48只。将其随机分成4组：模型组、中药高剂量治疗组、中药 低剂量治疗组、西药治疗组，每组12只。除空白组外其余各组动物均饲喂高热量饲料， 计16周。 3治疗方法：中药高剂量治疗组和中药低剂量治疗组每El灌服中药汤剂，剂量分别 9mg／kg和11、25mg／kg；空白组灌服等量生理盐水，治疗6周，均普通饲料喂养。 观察指标和检测方法 l ET—l水平测定：采用放射免疫分析方法，试剂盒由301医院东亚免疫技术研究 所提供，操作按说明书进行。 2常规固定及石蜡包埋、切片进行大鼠肾脏形态学观察。 3免疫组化方法检测肾局部ET．1蛋白表达：采用冰冻切片，试剂盒由武汉博士德生 物工程有限公司提供，操作按说明书进行。 实验结果 1对各组大鼠血浆ET一1水平的影响如表1所示 ·64· 诮谒病第四届学术研讨会论文集 表1、各组大鼠血浆ET一1水平的比较(一X±s) 统计结果显示：实验性糖尿病大鼠血浆E卜l水平均明显升高，与空白组相比差异 组为著(PO．01)；中药低剂量组和西药组疗效接近。 2各组大鼠肾脏形态学观察 2．1光镜检测所见： 模型组大鼠皮质区肾小球弥漫性缩小，周围小管萎缩，间质增生，炎性细胞浸润。 高倍镜下可见肾小球系膜细胞增生，毛细血管腔塌陷。中药预防组大鼠皮质区肾小球和 髓质区肾小管几乎正常。中药高、低剂量组可见到肾小管问质增生，部分肾小球系膜基 质增生。西药组肾小球、肾小管在皮质区均有不同程度的损伤，肾小球体积局灶性缩小， 间质增生，肾小管代偿性扩张。 2．2电镜检{贝1l所见： 模型组可见肾小球基底膜有节段性、局灶性增厚，有的增厚形成突起状，并可见局灶 性的足突融合改变。中药预防组、高低剂量组基底膜厚薄均匀，未见足突消失、融合等改 变。西药组可见轻度的基底膜局灶性增厚，小管上皮细胞可见弥漫性线粒体空泡变性。 3对DN大鼠肾脏局部ET-1蛋白表达的影响： 我们采用定性和半定量两种方法进行判定。定性法根据细胞膜被染成棕褐色为阳性 结果。半定量方法是根据一个视野下阳性反应颗粒占细胞总数的比例定为：阴性(一)， 表2、各组大鼠肾组织ET一1蛋白表达情况比较 01 注：}：与空白组相比PO．0l△：与模型组相比PO ·65· 消渴病第四届学术研讨会论文集 统计结果显示：实验性DN大鼠肾组织ET一1阳性表达明显增加，与空白组相比差异 显著(PO．01)。药物治疗可显著降低肾组织ET-1阳性表达，以中药预防组和中药治疗 组疗效著(PO．01)。 讨论 ET一1是一种具有缩血管和促进细胞生长增殖的生物活性多肽，可通过旁分泌和自分 泌方式发挥作用，致肾小球毛细血管收缩，肾小球内高压，同时可刺激系膜区基质堆积 和毛细血管基质增厚，促进肾小球硬化和肾功能恶化。本研究测定了实验性刚大鼠血浆 ET一1水平，结果显示：模型组大鼠血浆ET一1水平明显增高，与空白对照组相比差异显著 (PO．01)。而干预治疗可明显降低其血浆ET—l水平，尤以中药预防组和高剂量组为著 可刺激ET—l的合成和释放，而干预治疗可明显降低血浆ET一1水平，与文献报道