微流控技术在生物与化学中的应用研究.pdfVIP

第37卷 分析化学(FENXIHUAXUE) 增刊 2009年10月 ChineseJournal C010 ofAnalyticalChemistry 微流控技术在生物和化学中的应用研究 孙一 孙康 刘颖呋 曲伟思 蒋兴宇鼎 (国家纳米科学中心，中科院纳米生物效应与安全性重点研究室，北京t00190) 近年来，微流控技术在生化分析中得到广泛的应用，比如对于蛋白质和核酸相互作用的检测， 纳米颗粒的合成，细胞图案等。微流控可以通过点阵交叉的方式进行高通量的检测，实现多个样 品多参数的同时检测。由于其样品使用量一般只有几微升，对于珍贵样品和试剂的分析非常有用。 在微流控芯片中的分析通常是在基底上进行的固相分析，不同的芯片基底对于分析影响很大。基 于聚碳酸酯滤膜的微流控芯片可以成功的进行HIV检测。高压电纺技术作为一种简便的，相对大 规模的制备微纳米级纺丝纤维的方法，广泛应用于制各各种材料的微纳米级纤维，由这些纤维组 成的无纺布薄膜具有很高的比表面积。利用高压静电纺丝薄膜作为微流控芯片的基底可以提高蛋 白的吸附能力，从而提高检测的灵敏度，与聚碳酸酯滤膜比较，对于HIV抗体检测的灵敏度提高 了一个数量级。高压静电电纺技术可以将不同材料进行电纺，在微流控芯片中得到不同应用。 浓度梯度在细胞生物学，药物筛选，疾病检测等有重要的意义。在许多生命过程中，诸如细 菌的觅食、细胞的化学趋药性、胚胎组织发育、细胞迁移以及神经元轴突的生长取向等，都需要 特定的生物、化学分子在溶液中或者表面上形成相对稳定的浓度梯度。在药物筛选中，制备合适 的动力学的浓度梯度，有利于缩小尝试范围，优化反应条件，从而提高筛选的效率。在疾病检测 中应用浓度梯度，可以有助于定量的检测到病原体的浓度，为疾病的早期治疗争取到宝贵的时间。 传统制备浓度梯度的方法有凝胶扩散法，微试管扩散法，以及一些特定加工的小室扩散法。这些 方法难以制备稳定的，精确的浓度梯度。应用微流控的技术，可以通过精确控制流体在微流管道 的流动及混合，产生浓度梯度。生成的梯度有从简单的线型发展到任意形状，有流动型和固定于 表面型的，有集成型的和模块化的。我们在进行浓度梯度的控制研究中将浓度梯度与微流控结合， 可以在纳升以及纳升以下体积的流体中产生所需的浓度梯度。这样实质上是提高了浓度的空间分 辨率，可以更为精确地研究生命过程、提高通量以及降低反应物的消耗。 基于自组装单层膜(SAM)、微接触印刷和微流体通道，本课题组构建了一系列用于一种或多 种细胞图案化培养生长的体外模型，并应用于细胞生物学研究中。通过在金、钯等贵金属表面组 装自组装单层膜可以稳定地控制表面性质。通过替换单层膜分子自由端的功能团，可以有效改变 表面性质，使之呈现亲水或疏水性，并进而控制蛋白质吸附和细胞粘附。在促进细胞粘附的表面 包被细胞外基质蛋白，即可形成细胞培养的良好表面。利用微接触印刷结合自组装单层膜可以形 成上述不同表面交错排列的具有特定微尺度结构的图案。此外，微接触印刷还可以直接用于印刷 蛋白质，形成蛋白质图案。这些图案化的表面可以用于细胞培养，进而实现细胞图案化。采用该 技术，可以控制单个细胞以及多细胞群落形成具有不同几何形状的图案。将图案化表面和微流体 通道相结合，在不同通道中种入不同种细胞，可以形成多细胞共培养系统。我们还发展了用电化 学和光化学控制自组装单层膜的技术，从而可以使细胞从几何图案中迁移出。这些技术可以用于 研究细胞迁移有关的基本科学问题。例如，利用该系统发现了细胞迁移方向与细胞极性的相关性。 这些技术还可以和我们发展的浓度梯度发生技术相结合，形成表面和溶液中的浓度梯度，并进而 ‘E-nmil：xingyujims@。nanoe,tr．gn C010 分析化学 第37卷 用于细胞生物学研究。例如，我们发现神经细胞突起倾向于沿浓度梯度变化率最大的方向生长。 在离子检测体系研究过程中，如何建立高选择性和高灵敏度的检测体系一直是研究工作热点。 本研究组最近的研究工作中基于叠氮基团与炔基间的clickreaction建立的功能化纳米金检测体系， 可通过肉眼可见的颜色变化选择性的