取代酚对发光菌的联合毒性的研究.pdfVIP

莫凌云1，张天生1，刘树深L2，易忠胜1，刘保奇1，葛会林1 (1桂林工学院材料与化学工程系，广西桂林541004 2长江水环境教育部重点实验室，同济大学环境科学与工程学院，上海200092) 取代酚是重要的化工原料或中间体，在染料、炸药、农药等生产之间有重要的地位【l】。过去对于有机 污染的研究大多只注重单个污染物的研究，但在现实生活中，生物体很少暴露于一种污染物中，而是同时 或先后暴露在多种污染物中，以单一毒性效应制定的有关评价标准无法真实反映环境质量要求，所以进行 联合毒性研究具有很重要的现实意义。 发光菌法是以发光菌作指示物的毒性测试法，发光菌法是近年来发展起来的一种新的生物毒性检测方 法【z】。该方法可以在较短的时间内进行大量化合物毒性测定，具有简便、快速、灵敏、廉价、应用广等优 点。本文就是以发光菌-淡水发光菌青海弧菌为指示物，测定五种取代酚对发光菌的单一毒性和联合毒性。 并对其联合作用进行评价。 1．实验部分 1．1主要仪器和试剂(略) 1．2实验菌种(略) 1．3单一毒性的测定 150uL的蒸馏水作空白对照，每个浓度梯度设三组平行，将培养好的菌液100uL加到微扳中，然后，将微 板送入微板光度计中测定各孔样品的发光强度，并用12个空白对照的发光强度平均值而与各浓度3个平 行样的发光强度平均值，计算不同浓度毒性的抑制发光毒性脲=(1一样品发光度／对照发光度)x100％(1)． 并用毒物浓度和对发光菌的抑制率来描述出剂量-效应曲线。每组浓度梯度作三个平行实验，标准偏差低于 10％，所有数据均用origin7．5软件处理。 1．4联合毒性的测定 根据单一毒性的试验结果3，5·二羟基甲苯、2，3·二甲基苯酚、对氯苯酚、邻氯苯酚、2，4氯苯 酚分别按等效应浓度比和均匀试验设计法混合，设置联合毒性试验的浓度梯度(10一．．．10-Smol／L)，各混合 体系的测定方法与单一体系相同，每组浓度梯度设3个平行实验，标准偏差不超过10％。采用浓度加和作 用和独立作用来评价混合体系的联合毒性。 2．结果和讨论 2．1单一毒性的评价 表1剂量一效应曲线非线性拟合函数 Name Inverse Function(R) function(F1) Wcibull(W) E=1-exp(-exp(af_+fllg(c))) C=lOA(On(．In(1．E))．岔泊 本文根据参考文献一一J中的10个非线性函数来描述各种污染物的剂量-效应曲线，并用最小均方根误 差判别标准确定最佳模拟函数。结果表明．对于本文所研究的5个取代酚，最佳DRC模拟函数只有1个， 其它9个函数都未能得到展佳结果。这两个函数就是Weibull函数，其表达式及其反函数形式见表1。由 首届西部地区分析化学学术研讨会论文集 实验剂量一效应数据经非线性模拟得到模拟函数后，就可利用其反函数求得各效应浓度ECro5种取代酚的 EC数据参见表2 表2 5种酚类化合物对Q67发光菌毒性作用(Ec50，molt／L) 二氯苯酚)对氯苯酚2，3-二甲基苯酚)邻氯苯酚)3，5一二羟基甲苯。 2．2联合毒性评价 结构相似的化合物对发光菌可能具有相似的作用机制，具有相似作用的化合物构成的混合物产生的联 合毒性具有浓度加和规律。5种取代酚具有相似的化学结构，应属于相似作用物，所以预测它们之间的联 合毒性应符合浓度加和。为验证这一观点，将这种取代酚以等效应浓度比、均匀试验设计混合。根据S种 取代酚的剂量-效应曲线，通过非线性曲线模拟和迭代运算，准确描述剂量·效益曲线并求解其相对应的高 效应浓度如EC99和低效应浓度ECl，并利用刘树深教授的程序得出5种取代酚混合预测的浓度加和和独 立作用的值。用OriginPr07．S，根据实验值、预测的浓度加和和独立作用的值作图。 图l等效应浓度比对发光菌的毒性 图2均匀设计对发光菌的毒性 (。)空白值，．(·)实验数据，(一)浓度加和预测，(…)独立作用预测 从图l，图2，可以