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wereisolatedfromSprague-Dawleyratsandpurifiedbytheabilitytoadheretotheculturalplasticinvitro.ThenBMSCs
wereexpandedbysubculturesuccessively.AllthethirdpassageBMSCswere.utilizedforserialexperimentsasfollowed,
respectively:Firstly,thecellswereculturedrespectivelywithmediumcontainingdifferentconcentrationof17β-E2.
Secondly,theproliferationeffectof17β-E2onBMSCswasinvestigatedbyMTTmethod,sothattodeterminetheoptinal
concentrationof17β-E2.Thirdly,Hoechst33258stainingwasusedtomeasuretheeffectoftheoptinalconcentrationof
17β-E2onBMSCsDNAcontent,toexploretheproliferativepotential.of17β-E2onBMSCs.Then,theeffectsof17β-E2on
BMSCs5-aza-inducedskeletalmuscledifferentiationweredeterminedbyImmunofluorescencestaining(IF)andterminal
deoxynucleotidyltransferase-mediatedfluorescein-conjugateddeoxyuridinetriphosphatenickend-labeling(TUNEL)assay,
todetectexpressionlevelofskeletalmuscledifferentiationmarkersand5-aza-inducedBMSCsapoptosis
respectively.Amongallexperiments,BMSCswereculturedwithnon-17β-E2mediumascontrolgroup.ResaultsMTT
methdshowed17β-E2concentation-dependentlypromotedBMSCsproliferationability.Theoptimalconcentrationof
17β-E2waslnmol/L.Hoechst33258stainingsuggested17β-E2couldincreaseBMSCsDNAcontentwithculturetime
dependency.On48hours,theeffectwasslight;on7days、 14days,theeffectwasstatisticallysignificantcomparedwith
controlgroup.17β-E2couldenhancetheexpressionofskeletalmuscledifferentiationmarkers.TUNELassaysuggested
5-azacouldinduceBMSCsapoptosis.Furthermore,TUNELpositivecellsratioincreasedbytimedependency.17β-E2could
reduceTUNELpositivecells,thedifferencewasstatisticallysignificantcomparedwithsingle5-azainductiongroup.
Conclusions17β-E2couldpromoteBMSCsproliferation,enhanceskeletalmuscledifferentiationofBMSCsinducedby
5-aza,andreduceBMSCsapoptosisby5-azainduction.
KeywordsBonemarrowmesenchymalstemcells;Estrogen;Proliferation;Differentiation
聚丙烯网片非感染状态下生物相容性的病理及超微结构研究
罗新 张仙 范瑾 帅翰林 蒋学风 李瑞满
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