Connexin 43 在银杏叶提取物抗大鼠脑缺血损伤中的作用宰.pdfVIP

·724· 中国中医急症2012年5月第2I卷第5期 Connexin 43在银杏叶提取物抗大鼠脑缺血 损伤中的作用宰 于永娟 牟芳芳张泽安△田雪松姜昕路萍萍 (上海中医药大学，上海201203) 中图分类号：R285．5文献标志码：A文章编号：1004—745X(2012)05-0724一04 【摘要】目的通过体内体外实验研究缝隙连接蛋白43(Cx43)与EGb76l脑缺血神经保护作用的关系，探讨 银杏叶制剂EGb761治疗脑缺血的机制。方法在大鼠原代神经细胞中转染荷载C“3—8hRNA的慢病毒．干 200 扰C“3蛋白表达，同时给予EGb76lIJ∥mL处理观察Cx43的表达以及ECb76l对Cx43蛋白表达的影 响。建立大鼠脑缺血模型，腹腔给予EGb76l50、100 rng／l【g，使用HE染色，1f】rc染色，免疫组化和westemblot 方法检测大鼠脑组织细胞的形态变化和大鼠海马Caspa∞一3．’rUNEL阳性细胞．Cx43，p—Cx43蛋白的表达变 化。结果EGb761给药可以减少脑缺血大鼠脑组织梗死面积，显著性抑制脑缺血大鼠海马Caspase一3表达和 TUNEL阳性凋亡细胞数目，显著性抑制大鼠海马神经细胞p—Ck43的表达水平。体外培养的大鼠神经细胞转 染Cx43—8llRNA慢病毒，给予ECb76l处理，处理前后神经细胞Cx43，p—Cx43蛋白表达未见明显变化。结论 EGb76l可以减轻脑缺血缺氧引起的细胞损伤。其神经保护作用与抑制缺血引起的缝隙连接蛋白C“3的表 达和激活有关。 【关键词】银杏叶提取物缝隙连接蛋白shRNA Ⅱf的tofC咖慨in43in F咖屺6佃0f Ext珀ctillRa缸耐伍I∞hemic NeIlroprote甜veGink印Bnoba hdury yu|，o，曙0蝴，们u几憎和g。删M历—∞，以以醌喇出面踟如e揩妙旷m出如删吼沁卯胁d证ine， S^∞融缸，201203 rolesofCx43 inEGb76l—mediated andtoinvesti· the 【Abstract】Objec吐Ve．1o麟plorepmtein neuropmtection tIlemechanismofi∞heIlljc仃ea劬entEGb761．Methods：}ht cell8weretmnsfected gate by prima玎neur{onal by Cx43一shRNAand衄8ted诵tII and100 EGb76I一200u咖1．R出we阳delive陀dw汕EGb761(50mg，I(g m以g)by min thebmin 30 middle ratsbrainwemobtainedandused intraperitonealinjec石on befo他0ccluding anery，tIlen HE we8tem 0fCx43and were level s“ning，1Tcstaining，immunohistocheIlIi8哆肌dblottechniqIle8．The p—Cx43 detec州and in m啪ncdkaIldbrainti8su髓．R幅ul扛：EGb761reducedtIlebrajnimrctv01一 c哪p呲dprimary ume，inhjbited the decre船ed the∞um腿l in si明墒c彻dyc曲pa钾一3expreB8i明andremarkably apopto