电化学研究耐尔蓝和DNA的相互作用.pdfVIP

电分折化学进展·1999 电化学研究耐尔蓝与DNA的相互作甩。 赵广超朱俊杰陈洪渊 (南京大学化学系 南京210093) 小分子与DNA的相互作用一直是人们关注的研究方向，因为这对癌症的治疗及抗癌药 物的合成具有指导意义。在这类研究中，小分子染料象吖啶橙[“、亚甲蓝o。3等日I起了人们的兴 趣．由于它们具有环状平面结构且大多带有正电荷，在与DNA作用时既具有嵌入作用又有静 电引力作用，因此它们能强烈的作用于DNA． 耐尔蓝(Nile BIue)是一种具有平面四环结构的染料，广泛应用于修饰电极．它既有平面结 构又带有正电荷，与其它染料一样．可以预计，它能强烈地作用于DNA，但关于它与DNA相 互作用的研究却未见报道．本文用电化学结合光谱方法，研究了它与DNA的相互作用，并通 过}CD的包络作用，翔断出是耐尔蓝分子中的萘环部分嵌入了DNA的碱基对之中。 o．2m01．L．1Tris—HCl(pH7．z)缓冲溶液中，一o．15～一0．60V(vs SCE)电位范圈内，耐尔 蓝在铂电极上有一对氧化还原峰，当扫速为50mV．s“时，其阴、阳极峰电位分别为一0．431v 和一0．370V。表观式量电位F’为一0．400V，其峰电位差衄．为6lmV．蜂电位与扫速无关而 峰电流与扫速的平方根成正比，这表明这一过程是～准可逆的电子传递过程(如图1a)．当有 电位Eo’为一o．38‘V，稍向正电位方向移动，但△E’几乎没有变化，说明}cD的存在不影响耐 尔蓝的电摄反应的可逆性。根据峰电漉随争cD浓度的变化关系，求得其包络常敷为1．4x 103L．morl。实验结果表明，该包络物是一十1；1的包络物。紫外光谱实验表明pcD包络的 部位是耐尔蓝的萘环部分。 在有DNA存在时。耐尔蓝的氧化还原峰电位几乎没有变化，但峰电流明显减少(见图 1c)。峰电位的不变而蜂电流减少有两种可船的原因ti)耐尔蓝分子与DNA反应生成新的化合 物，且在电极上无响应I“)耐尔蓝的氯化态和还原态同DNA有相同的结合能力．为了确证是 哪一种原目导致电流的藏少t我们做了薄层光谱电化学实验，发现当DNA浓度是耐尔蓝浓度 的三倍时，耐尔蓝的光谱不再随电位的改变而发生变化，这表明与DNA结合后的耐尔蓝不再 在电极上发生氧化还原反应。因此，峰电流的降低是由于溶液中电活性物质浓度降低而引起 的。根据峰电流与加人的DNA浓度之间的关系，求得耐尔蓝与DNA的结合常数为1．2× 105L／mol。 在大量的争cD存在下。耐尔蓝仍能同DNA发生相互作用，也就是说，耐尔蓝的争CD一包 络物仍能同DNA作用(见图1d)。不同量的DNA存在下，包络物的氧化还原峰电位不发生变 化，只是其峰电流随DNA的增加而逐渐降低，导致这种现象出现的可能原因有：i)包络物与 ·国采自然科学壹助理目(批准号：2983sllO) -62· 电分析化学进展·1999 DNA作用后，在电极上没有响应，从而降 低了电活性物种的浓度；ii)包络物在与 DNA作用时分解，而分解后的耐尔蓝再与 mqA作用后在电扳上投有响斑。紫外光谱 实验被用来判断包络物是否分解。实验结 果表明，当DNA浓度较低时，包络物不分 解，这时包络物与DNA之间的作用力主要 是静电引力·但当大量DNA存在时(cm一 3‘t-·)时，包络物分解，这时耐尔蓝与 DNA之间的作用主要是嵌入作用。同时， 表明耐尔蓝分子中嵌人DNA中的那部分 与包络进}CD空腔中的是同一部分，由于 实验证明耐尔蓝分子中的萘环部分进入了 阻CD的空腔，因而有理由推断嵌人DNA 的那部分是耐尔蓝分子中的萘环部分。这 一事实对进一步探讨外界化学物质对 图1循环伏安圈 DNA的作用有现实意义。 - (扫速50Inv．8～，O．2m01．L-1Tri8_Hcl曩冲藏) 考文献