壳聚糖微胶囊用于大肠杆菌(E.Coli)培养地研究.pdfVIP

壳聚糖微胶囊用于大肠杆菌(E．Coil)培养的研究 付颖丽雄鹰刘袖洞何洋刘群于炜婷马小军· 02 3) (中国科学院大连化学物理研究所生物医学材料工程组大连116 e。◎ ④暑受=萤+日ALG 海藻瞳钠诫滴 拇蒹陵饼皎玮 与壳橐糖反应 中和表面电性 液化成ACA做胜羹 (舍E．C01．i) 图1． ACA生物微胶囊的制各过程 通过改变针头内径、注射器泵的速度、空气的流速等物理条件．海藻酸钠、壳聚糖浓度、成 膜反应时闯等化学条件，以及E．Coli的初始微囊化密度等生物条件，制备具有不同性能的生物微 胶囊。 ’联系人地址：116023，中科院大连化学物理研究所生化工程室E-mail：maxj@dlcp．ac．cn 】j 1．3．2馓胶囊性能检测方法 微胶珠直径D。及微胶囊直径ID。的测定：在显微镜下随机读取50个微胶(珠)囊的直径后取算 术平均值： 膜强度的表证：以膨胀率S表示： S(10096)=(DL3-D03)／D03： 微胶囊膜厚度L的铡定方法3： L=R{1一[(W-一w．)／W-]”) 其中：R为微胶囊半径，L为完整徽胶囊湿重，吒为微胶囊膜湿重； 微胶囊移植动物体后的破损率： 破损率(100％)=O扩N^)／NB 其中：N。为移植前微胶囊的个数，N^为移植后回收微胶囊的个数； 微胶囊移植动物体后的回收率：回收率(100％)=(VB-V．)／VB 其中：V。为移植前微胶囊的总体积，v^为移植后回收微胶囊的总体积。 l_3．3 E．CoIi的培养： 摇床中培养，隔时取样观察。 1．3．4动物实验： 将制备的不同性能的微胶囊通过灌注口服及皮下注射的方式植入小鼠体内，隔时处死， 考察微胶囊在体内的停留情况及小鼠的生长状况。 2结果与讨论： ACA微囊化E．Coli的制备过程牵涉到微胶囊膜材料、成膜反应、制备工艺及菌体生物学活性 保持等因素，因此影响因素众多。 2．1微胶囊的制各条件对微胶囊陛能的影响： 通过改变微胶囊制备过程中的物理、化学及生物条件，可以制备出适合不同培养条件的生物微胶 囊。 2．1．I物理条件的影响 在保持其他制各条件相同的条件下，微胶囊的粒径随针头内径的增加而增大，随注射器泵速 的降低而减小，但膜厚及膨胀率差别不大。空气流速对微胶囊粒径的影响则是随气速的下降粒径 反而增加。 2．1．2化学条件的影响 在一定范围内．随海藻酸钠浓度的增加，微胶囊的粒径增大．强度和弹性降低。壳聚糖溶液 的浓度及成膜反应时间主要影响微胶囊的膜厚和渗透扩散性能。在其他条件相同的情况下，溶液 浓度和成膜时间增加，微胶囊的膜厚增大．渗透扩散性能下降。 2．1．2包埋物E．Coil对微胶囊渗透扩散性能的影响 微胶囊的渗透扩散性能直接影响到 包埋物营养物质的供给和代谢产物的跨 膜传递。因此，对包埋有菌体的微胶囊 的扩散性能进行考察是十分重要的。由 于E．Coil的存在．使得海藻酸钠的总体 密度降低．ACA微胶囊的通透性能提高， 这在一定程度上加快了营养物质及菌体 代谢产物的传输。从图2，实验结果还可 以看出．外界的营养物质能够快速 地从囊外扩散进囊内，并在一个较段的时间内达到平衡，这对维持菌体生长和代谢是十分重要的。 152 2．2微囊化E．Cell的培养特性 利用ACA微胶囊作为E．Coli培养的微反应器具有很多优点：o生长空间可控；oE．Coli对剪 切力的耐受性能提高；o微囊膜的存在使目的产物的分离纯化变的容易，同时还自＆够促进E．Coli的 代谢：oE．Coli培养过程中的耐污染性能提高。 化培养的新篇章。与悬浮培养和胶珠固定化培养相比，微囊化培养更有利于E．Coli的生长和代谢。 E．Coli在微囊化培养一段时间后．菌体开始聚集．