抗人肺癌蛋白质肽类药物地研究.pdfVIP

抗人肺癌蛋白质肽类药物的研究 陈耀宗 臧林泉 [关键词] 肺癌；蛋白质肽类药物；肽库技术 肺癌是最常见的肺原发性恶性肿瘤，绝大多数肺癌起源于支气管黏膜上皮， 故亦称支气管肺癌，是一种严重威胁人们健康和生命的疾病。近20年来，我国 的肺癌发病率以每年11％的速度递增，总患病率已占到男性恶性肿瘤的首位。目 前对肺癌患者常见的化疗和放疗手段往往导致严重的副作用，因此寻找高效、低 毒的抗肺癌药物是目前的热点之一，而新型的蛋白质肽类药物具备了这些特点。 cuculiferum和Polysyncranton lithostrotum中发现了一个含有13个氨基酸 ti 的双环肽Vilevuamide，其结构上与紫杉醇类似物有微小的联系，但其立体构 形还未完全清楚，尚在研究之中。试验表明，Yitilevuamide对人肿瘤细胞株有 明显的抑制作用。与传统的抗肿瘤药物相比，多肽类药物在有较强药效的同时， 对机体正常组织的伤害明显降低。 1．2从生物毒素中提取的多肽 ooO～7 基酸残基组成的多肽，№6 000，是眼镜蛇毒中№较小的活性多肽。许 云禄等(8】应用凝胶过滤、离子交换柱色谱及疏水柱色谱等方法从舟山眼镜蛇 能抑制人肺腺癌A549细胞的增殖。 在中国东亚钳蝎的毒液中分离纯化得到抗瘤止痛肽ANTP，Mr为6280，其N 国东亚钳蝎毒液的抗瘤止痛肽(AGAP)的基因，并在大肠杆菌中获得表达。大部分 重组的AGAP以包涵体的形式表达。重组后的AGAP在小鼠体内试验具有抗肿瘤和 。 止痛活性(9，10】 1．3从人类自身得到的多肽 麻亚锋等(11】从人尿中分离纯化抗肿瘤多肽，从健康男性尿液中得到了抗 瘤多肽UAP，由Glu、Leu、Pro、Tyr、Ala等氨基酸组成其№小于1000。体 内实验表明，UAP对小鼠LEWIS肺癌有明显抑制作用。张冬梅等(12)在以上工 作基础上合成了一系列多肽及其类似物，分别研究了它们的抗肿瘤活性，从中筛 选到1个具有很强抑瘤作用的八肽，定名为NDl00，Mr为846．9。体内抑瘤试验结 果表明，NDl00对小鼠Lewis肺癌有明显抑制作用，有效剂量为2．5mg／kg，当使 用高剂量(15 mg／kg)时，对小鼠移植性肿瘤的抑制率达70％以上，且具有量效关 系。同时NDl00对小鼠红细胞和白细胞的数量均无影响。 1．4多肽的改造 经膜受体与肿瘤细胞黏附，在肿瘤的侵袭和转移过程中发挥了重要作用。刘丽艳 等(13】设计合成了用赖氨酸的2个氨基把Arg-Gly-Asp(RGD)和 甘丝精氨酰甲酯，该化合物降低了LA795细胞肺转移小鼠的肺重量和肺转移瘤结 节数，对LA795小鼠肺腺癌细胞自发性肺转移表现了明显的阻滞作用，具有较强 的抗肿瘤侵袭活性，有进一步的应用和开发研究前景。 154 含有氧肟酸的环肽CHAPl是1种组蛋白去乙酰化抑制剂，可以抑制组蛋白去 象一活性研究，筛选出了活性和稳定性最强的1个化合物CItAP31。体内实验表明， CHAP31对肺癌DMSl 14生长有一定的抑制作用，有希望成为新一代的抗肿瘤药物。 2抗肺癌蛋白质肽类药物的研究方法 组合肽库筛选技术对新肽的发现至关重要。噬菌体肽库是生物肽多样性最主 要的例子，利用噬菌体肽库技术筛选到的多肽通过对其结构的测定，利用DNA 重组技术，将重组对象的基因插入载体，拼接后转入新的宿主细胞，构建成工程 菌(或细胞)，实现遗传物质的重新组合，并使目的基因在工程菌内进行复制和表 达，最后将表达的目的产物纯化并做成制剂，得到重组多肽、蛋白质类药物。现 在着重介绍噬菌体肽库技术在这方面的应用。 2．1噬菌体肽库技术 噬菌体肽库技术是将大量随机合成的肽段与噬菌体外壳蛋白融合表达并展 示于噬菌体表面，这种由表面表达有各种外源肽段的噬菌体就构成了随机肽库。 用特定的靶分子通过亲和淘洗，能够高效、快速、简便地从噬菌体随机肽库中筛 选到与特定靶分子结合的噬菌体肽，大大简化了蛋白质表达的筛选和鉴定。目前 该技术用于肿瘤导向治疗研究主要集中在3个方面