喜树碱生物合成探究进展.pdfVIP

喜树碱生物合成研究进展 赵心清 张冬艳 白凤武 谢健 李宁 (大连理工大学生物工程系，大连 116012) 摘要 喜树峨是我国特有植物喜树 (Canwwth~ 二。inataDecne.)中的具有杭疮活性的生物峨，在临 床上用于治疗磅脱痛，可痛，结肠、直肠疹、白血病等。作为发现录早的植物天然拓扑异构醉I抑制 别，喜树城还具有执爱滋病毒的功效。现代生物工程技术为喜树城生物合成的研究提供了巨大的动 力、本丈练述了喜树城生物合成研究的进展.喜树细胞培养有望成为生产喜树城的替代方法，已经成 功在培养细胞中检浏到喜树减的存在，培养方法的进一步改进将进一步提高培养细胞喜树城含黄。对 喜树城的生物合成途径的研究表明，喜树碱的合成途径区别于其他叫味生物城之处在于，合成过程中 特单位的始终保留，这可能与喜树城合成后的运愉有关，这提示了对喜树城生物合成后修饰研究的重 要性。对喜树城合成途径的三种璐基因，色氛故脱效醉、3-介基一3一甲墓戊二眺辅阵A还原阵、色 氛故合成醉基因的研究表明，三种醉基因即受发育阶段限制，又受外界胁迫影响，这提示可以用胁迫 手段调技喜树城的生物合成。对喜树城生物合成透径的深入研究将有助于更加主动的妆制喜树城的生 物合成。生物技术将为大1生产喜树械提供新的替代途径。 前育 喜树 (CampiothecaacuminataDecne.)是我国特有洪桐科植物，主要分布于长江流域及其以 南各省区。自古以来喜树即为重要药材，且可全株人药，用于治疗恶性肿瘤、痈毒等疾病。喜树 的有效成分是喜树碱 (Camptothecin，简称CPC)(结构见图1)和10一经基喜树碱 (简称10一OH 一CPC)，其中喜树碱在临床上用于治疗膀胧癌，胃癌，结肠、直肠癌、白血病等。10一羚基喜 树碱可用于治疗肝癌与头颈部肿瘤。川喜树碱是发现最早的植物天然拓扑异构酶I抑制剂，是一 种广谱的抗肿瘤药物，而且由于拓扑异构酶I的活性与HIV病毒的反转录功能有关，喜树碱作为 拓扑异构酶I的抑制剂也可具有抗爱滋病毒的功效。有关喜树碱对HIV相关的恶性肿瘤如克氏肉 瘤 (Kaposissarcoma)和HIV相关淋巴瘤的治疗效果正在临床测试中。一例由]C乳多空病毒对 中枢神经系统的机会感染导致的渐进性多病灶白细胞脑病 (progressivemulti(ocalleukoencephalo- pathy,PML)病人经喜树碱治疗后表现了症状上的改进 (symptomaticimprovement)。E2]因此喜树碱 对非恶性肿瘤的治疗效果也在进一步的研究中。 喜树碱的抗癌活性是1966年美国国立癌症治疗服务中心 (CCNSC)的MonroeE.Wall博士最 初发现的，随后1969年，中国也成功的从喜树中分离出了喜树碱。此后，美国，日本和我国等 国家的林学家、化学家、生化学家、药学家等对喜树碱进行了大量研究，发现了喜树碱的活性 与构相间的关系，并发现了喜树碱的多种天然类似物。80年代发现喜树碱的拓扑异构酶 1的抑 制剂活性后，全世界更是掀起了喜树碱研究的热潮。到目前为止，美国、日本、澳大利亚等国 已从喜树中提取出六种喜树碱类似物，并临床用于治疗各种癌症。喜树碱是非常有前途的抗肿 瘤药物，被誉为二十一世纪抗癌与抗爱滋病的首选药物。f3]我国有丰富的喜树资源，开发利用喜 树有用资源，使其发挥出良好的经济效应，势必成为我国中药工作者的研究目标。但由于我国 生产技术的落后和信息的滞后，我国对喜树的研究一直未受到重视，研究的深度和广度远远落 后于美国等发达国家。而对喜树及喜树碱进行生物化学、分子生物学的深人研究必将为我国更 好的开发利用喜树资源提供理论基础。 1 喜树碱的细胞工程研究 喜树碱在喜树枝、皮、根、根皮及果中的得率分别为0.004%x,0.01%,0.01%x,0.02%x, 7R 图I 容树碱的化学结构式 0.03 ，由于喜树果资源丰富，因而被选做生产原料，但大规模的生产一方面受地域、季节和气 候的限制，且质量难以控制，另外也势必对资源造成很大影响。为了更有效的生产喜树有用生 物碱，利用生物工程技术对喜树进行组织培养被认为是一条很有前途的替代途径。而要从本质 卜提高喜树碱含量，必须对喜树碱的生物合成规律进行深人研究。细胞培养研究表明，喜树碱 可以由细胞培养得到。早在1974年