5种中药黄酮对血管平滑肌细胞凋亡交互作用研究.pdfVIP

第16卷 长存中 医学院学报 Vd16 2000年7月 Aeade．mieP吲odlead。f 7．2000 C}mngehunCollege甜Traditiona／C拓㈣Medicine 5种中药黄酮对血管平滑肌细胞凋亡的交互作用研究 王伟1张涛2赵明镜‘钟{酽品希莹1崔巍‘张学中‘王磺仁‘靠维琴1 l北京中医药犬学东直门医院气血研究实验宣(100700)2．北京市。肺血管研究所动脉硬化研究室 3．建设郜总医院老年病科4．军事医学科学院情报医学研究所 【关键词l黄嗣类化合物血管平滑肌钿胞凋亡直接试验设计 方剂配伍的研究是近年来的热点，其研究的基本思路是 养液，井用PRS洗2次，然后进行分组试验．各用药组均同步 将方刺中的每一昧药做为一个独立园素．根据中医理论研究 加人实验用药和Ⅱ，l(100耐血)，每组各取3瓶细胞做同步实 各药味同的相互关系，进而揭示君、臣、佐、使的配伍规律。而 验．取平均值。 笔者以为方刺配伍的目的是将各药昧中对方荆整体作用有贡 1．3分组5种药的交互作用实验分组：按直接试验方案分 献的各化学成分直接作用于人体某些生理病理环节，各部分 组(如表1)；葛报索促进培殖vsMc凋亡的验证实验分组： 作用有机整台从而达到整体的最佳作用。因而。在方if6配伍 vsMc增殖模型组，葛根索组(浓度为10。M)，无血清培养组， 研究中将每～昧药饿为独立作用因素来对待还显不够．因为 正常培养组。药物作用48h后收集细胞，测定凋亡百分率。 药睐对人体直接起作用的基本单元应该是其化学成分．而不 l 4数据处理SAS软件分析结果。 应是某一味药。因此，本研究选择5种对心血管有明显作用 2结果 S,moth 的中药的有效单体，研究其促血管平滑肌细胞(Vmeulsr Mu∞le Cell，vsMc)揭亡的作用．为阐述上述观点提供依据。—5 20 l材料与方法 x 1．1材料动物：3月龄纯种雄性日率大耳白兔．普通饲料喂 藿甙、陈皮甙、香蒲新甙，药物作用时问、揭亡率)。可见，葛根 养。药物及试剂：葛根索、陈皮甙、黄革甙、淫羊藿甙均购自卫 葺}与淫羊藿甙埘增殖血竹平滑肌细胞有促凋亡作用，且有坍 生部药品生物制品鉴定所；香蒲新甙由北京中医药大学中药 同作用。当该2药单独仕用时促凋亡作用与给药{农度关系不 学院刘斌讲师惠赠，胎牛血清，美国Difieo公司生产；IMI)M， 太，但与时间呈正棚关。其余3种药均在低剂量时显示一定 美国Pro啪奸公司生产。 的促凋亡作用，在高刺持时可抑制凋亡。 投器：美国BD公司FAES420型漉式细胞仪，美国力高公 2．2葛根素对增殖vsMc捅亡影响的验证结果如图】一4 司5410型Oq培养箱。 正常培养组(胡性对照)凋亡率为7．5％．Ⅱ，l组掏亡率为 1．2方法 血管平滑肌细胞培养：采用空气桂塞法处死家 8．O％，葛根索组凋亡率为17．0％，无血清组(阳性对照)凋亡 兔，在严格消毒灭菌条件下，取出胸主动脉，立即放于PBS渡 O％， 率为25 中．剥离外膜上附带的结缔组织，冲洗血管摸内的残血，用剪 2．3各朋持组的非毒性作用的依据相差娃微镜下观察培 刀从正中剖开，刮去内膜面．冲洗掉内皮后．转人另一盛PBS 药组与对照组VSMC，形态正常，呈棱形、三角形或不规则形 的平皿中，用弯头镊撕下中膜乎精肌，丢弃外膜．将中膜剪成 状，未见细胞收缩、漂浮与死亡、胎盘蓝染色娃示用药组牙细 约1砌0的组